人骨髓成骨细胞培养法的改良及其体外成骨能力

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目的:探讨简便、易行的人骨髓成骨细胞体外培养方法,研究骨髓基质细胞在体外培养条件下的成骨能力.方法:抽取人骨髓组织,梯度离心后置于含100 mL/L小牛血清的DMEM培养液中,培养24 h换液,稳定传代后改用含地塞米松和β-甘油磷酸钠的条件培养液,用倒置显微镜观察、组织化学染色、四环素荧光标记等方法进行观测.结果:传代细胞4 d~5 d即可传代,在条件培养液中2 wk形成多层结构,并聚集成黑色结节.培养细胞ALP染色强阳性,结节四环素荧光标记、钙染色强阳性,Ⅰ型胶原免疫组化染色呈黄褐色.结论:本实验方法所培养的骨髓基质细胞符合成骨细胞的形态特征和生物学特性,并能在体外形成钙化的新骨组织.
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