内皮细胞在不同低氧模式下白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的变化

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目的 探讨不同间歇低氧(IH)和持续低氧(CH)模式下内皮细胞的炎性损伤.方法 在细胞培养舱中程控产生预置的间歇低氧/再氧合(IH/ROX)循环环境,将人脐静脉内皮细胞可传代细胞株ECV304暴露于该环境.分为间歇正常氧(IN)组(21% O2 15 s/21% O2 225 s,60次循环),IH组(1.5% O2 15 s/21% O2 225 s,30、60次循环),IH高碳酸组(1.5% O2 20% CO2 15 s/21% O2 5%CO2 225 s,60次循环),CH组(1.5%、10% O2,持续时间为15、30、60 min),CH高碳酸组(10% O210% CO2,持续时间为15、30、60 min),CH累加IH组(1.5% O2 15 s/10% O2 225 s,60次循环),不同IH程度组(1.5%、10% O2 15 s/21% O2 225 s,60次循环),不同IH频率组(1.5% O2 15 s/21% O2 225 s、315 s、495 s、105 s,60次循环)和不同IH时限组(1.5% O2 15 s、30 s/21% O2 225 s,60次循环).而后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养基中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,并测定细胞裂解液总蛋白含量进行标化.结果 IN组IL-6和TNF-α水平为(374.06±38.10)和(31.96±13.64)pg·ml-1·100 mg蛋白-1,而IH组2的IL-6和TNF-α水平为(770.40±21.60)和(126.93±2.58)pg·ml-1·100 mg蛋白-1,明显高于IN组(均U=0.000,P=0.002);IH高碳酸组IL-6水平为(829.27±7.16)pg·ml-1·100 mg蛋白-1,高于IH组2(U=0.000,P=0.002).CH高碳酸组的IL-6均明显高于相同经时反应进程的CH组(均U=0.000,P=0.002),CH累加IH组IL-6和TNF-α水平为(536.74±14.97)和(51.10±6.80)pg·ml-1·100 mg蛋白-1,高于IN组却低于IH组2(均X2=23.4,P<0.05).IL-6和TNF-α水平随IH程度加重而增加(均X2=23.4,P<0.05),不同IH频率组的IL-6和TNF-α水平则呈现出复杂变化.结论 IH和CH对内皮细胞造成明显炎性损伤并具有程度依赖性,伴高碳酸暴露时损伤更重;IH/ROX对内皮细胞的炎性损伤来源于ROX时段而非来源于IH时段.
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