【摘 要】
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目的探讨RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)沉默KPNA2(karyopherin a2)基因表达对人膀胱癌细胞系5637迁移和侵袭能力的影响。方法实验分为siRNA敲低组和阴性对照组。siRNA
【机 构】
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北京大学深圳医院泌尿外科,北京大学泌尿外科研究所,北京大学第一医院泌尿外科,北京大学第一医院病理科,
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目的探讨RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)沉默KPNA2(karyopherin a2)基因表达对人膀胱癌细胞系5637迁移和侵袭能力的影响。方法实验分为siRNA敲低组和阴性对照组。siRNA敲低组设计合成靶向KPNA2序列的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用LipofectaminTM2000方法瞬时转染膀胱癌细胞系5637;阴性对照组采用无关序列RNA采集。转染后48h,应用蛋白质印迹法检测KPNA2的蛋白表达;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果蛋白质印迹法检测结果显示,膀胱癌5637细胞转染KPNA2特异性siRNA 48h,与阴性对照组相比较,敲低组细胞KPNA2蛋白表达水平下降92.1%,差异有统计学意义,P=0.004 3。Transwell实验检测结果显示,敲低组细胞迁移能力明显受到抑制,细胞抑制率为61.7%,差异有统计学意义,P=0.038;敲低组细胞侵袭能力也明显受到抑制,细胞抑制率为58.6%,差异有统计学意义,P=0.026。结论靶向KPNA2的特异siRNA能够下调KPNA2在膀胱癌5637细胞中的蛋白表达水平,有效抑制膀胱癌5637细胞的迁移和侵袭能力。以KPNA2为靶点的RNA干扰技术有望成为膀胱癌基因治疗的新方法。
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