【摘 要】
：
利用PCR技术 ,获得了人体组织型纤溶酶原激活剂tPAcDNA的缺失突变体———rPA ;在此基础上 ,运用定点突变技术 ,得到rPA的定点突变体———rPA(KHRR2 96～ 2 99AAAA) ,rPA(A473
【机 构】
：
宁夏大学生物工程系; 军需大学军事兽医研究所; 军需大学军事兽医研究所 宁夏银川750021; 吉林长春130062; 宁夏银川750021; 吉林长
【基金项目】
：
全军医药卫生科研基金重点课题 (6 0Z0 5 0 );教育部骨干教师资助计划项目
论文部分内容阅读
利用PCR技术 ,获得了人体组织型纤溶酶原激活剂tPAcDNA的缺失突变体———rPA ;在此基础上 ,运用定点突变技术 ,得到rPA的定点突变体———rPA(KHRR2 96～ 2 99AAAA) ,rPA(A473S)和二者的复合突变体rPA(KHRR2 96～2 99AAAA A473S) ;将rPA及其 3个突变体分别亚克隆至原核表达载体pET 2 8a(+)中 ,获得表达载体pErA ,pErA(K) ,pErA(A)和pErA(KA) .酶切鉴定和序列分析结果均表明实现了实验设计的氨基酸突变 .表达载体转化大肠杆菌 ,经IPTG诱导、菌体裂解及SDS PAGE电泳分析发现 ,只缺失而无突变的pErA和突变的pErA(A)都未表达目的蛋白 ,突变体pErA(K)与pErA(KA)则获高水平表达 ;蛋白产量分别占菌体总蛋白的 35 .97%与 37.71% ,分子量均为 39.6kD .Westernblotting显示 ,表达产物与抗tPA抗体呈特异性阳性反应 .该产物经初步纯化后进行复性与活性 (mFAPA)测定 ,结果表明其复性产物具有明显的体外纤溶活性 .以上结果为rPA突变体的进一步纯化、体内活性研究以及规模化制备提供了基础
其他文献
文章从工业工程专业的情况出发,针对目前人机工程学的教材进行了分析,并探讨了人机工程教学常采用案例教学的作用与效果,目的是形成具有自身特点的人机工程教案,提高教学质量
将粮食钢筋混凝土筒仓仓壁的计算公式编写成EXCEL程序,能更经济合理计算仓壁配筋及裂缝控制。
<正>应抓紧研究对小额贷款公司的立法问题,尽早明确其法律地位、准入条件、经营范围、业务规范、行为准则、监管主体和处罚规定,为小额贷款公司合法、有序运转及监管部门进行
作为地方经济发展的重要力量,中小企业在国民经济建设中一直发挥着重要作用,但是不少中小企业持续被融资问题困扰。融资问题一直是制约中小企业进一步发展的主要因素。笔者分
目的研究大鼠脾气虚胃溃疡证病结合模型中回肠5-羟色胺(5-HT)及其受体(5-HTR)、细胞因子IL-2、IL-6的变化,探讨脾虚胃溃疡的发病机制及加味四君子汤治疗脾虚证的机理。方法采
以"微"窗口平台,即微博、微信等自媒体平台为出发点,分析微博、微信等自媒体对人们日常生活的改变,人们在享受现代科技带来便捷的同时遭受个人隐私被无情的践踏,进一步探讨法
目的研究冠状动脉临界病变患者硬化斑块稳定性与胰岛素抵抗指数之间的关系。方法利用血管内超声的方法检测了71例患者冠状动脉中斑块的稳定性,并将患者分为稳定斑块组和不稳
<正>一、提出的背景我国基础教育对现行的课程进行大胆的改革,新课程肩负着时代的使命。面对教学改革的实际需要,我们作了认真思考,采用探究式可被认为是课堂教学改革的理想
介绍了D70 0 - 31焦炉煤气离心鼓风机扩容改造的原因及要求。说明了改造条件和改造后的性能参数。改造后经性能测试和实际运行考核 ,并将改造前后进行操作记录对比 ,确认其增
近年来,随着国内人工成本的上涨以及工业自动化的发展,越来越多的工厂开始使用更多的智能化工业设备。在电机控制系统中交流伺服系统的控制性能最佳,本文设计了一款通用交流