受体相互作用蛋白激酶1对骨髓间充质干细胞生物活性的影响

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目的

探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)死亡、增殖、分化、迁徙等生物功能的影响。

方法

通过RNA干扰技术降低RIPK1在BMSCs中的表达后,光镜观察细胞形态变化,Transwell细胞迁移实验检测BMSCs迁移能力变化,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测BMSCs增殖变化,茜素红染色检测BMSCs成骨分化能力变化,油红O染色检测BMSCs成脂分化能力变化,阿新蓝染染色检测BMSCs成软骨分化能力变化,蛋白质印迹法(Western blot)分析BMSCs分化相关标志分子Runt相关基因2(Runx2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)的表达变化以及凋亡标志性分子裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、坏死性凋亡相关标志性分子p-RIPK3、RIPK3、p-MLKL的表达变化。两组间比较采用t检验,多组间比较应用单因素方差分析。

结果

小干扰RNA(siRNA)干扰24 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(0.46±0.00),siRIPK1组吸光度值(0.45±0.01),差异无统计学意义(t=1.923,P

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