【摘 要】
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【目的】人载脂蛋白B(hAPOB)是保持人体血脂恒定的重要蛋白,检测hAPOB具有重要的临床价值。【方法】本研究将hAPOB(97-526AA)序列连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-4T
【机 构】
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江苏丘陵地区镇江农业科学研究所,南京师范大学生命科学学院江苏南京210023,江苏大学土木工程与力学学院,江苏省句容市动物疫病预防控制中心,江苏省农业科学院畜牧研究所
【基金项目】
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江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(16)1054];镇江市科技局社会发展项目(SH2018003);句容市科技局民生计划项目(SF2018022693)
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【目的】人载脂蛋白B(hAPOB)是保持人体血脂恒定的重要蛋白,检测hAPOB具有重要的临床价值。【方法】本研究将hAPOB(97-526AA)序列连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-4T-1-hAPOB(97-526AA)原核表达质粒,然后将其转入宿主菌BL21,宿主菌表达出与预期分子量大小相符的80 kDa的融合蛋白;将纯化后的融合蛋白免疫湖羊,制备抗hAPOB血清并检测抗体效价。【结果】每次注射0.4 mg的原核表达抗原,湖羊抗血清的产生效果最佳;经间接酶联免疫分析(ID-ELIS
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