【摘 要】
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目的:探讨铅（Pb）暴露诱导小鼠神经元铜（Cu）蓄积，促进细胞氧化应激损伤的机制。方法:C57BL/6小鼠饮用300 ppm醋酸铅水溶液2个月建立铅暴露动物模型；小鼠海马神经元细胞系HT22细胞暴露于0～100μmol/L醋酸铅24 h,采用噻唑蓝（MTT）法筛选适宜的铅作用剂量，建立铅暴露细胞模型。石墨炉原子吸收分光光度法（AAS）检测铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞铜水平变化；Western
【基金项目】
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国家自然科学基金（81920108030,81773378）；
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目的:探讨铅（Pb）暴露诱导小鼠神经元铜（Cu）蓄积，促进细胞氧化应激损伤的机制。方法:C57BL/6小鼠饮用300 ppm醋酸铅水溶液2个月建立铅暴露动物模型；小鼠海马神经元细胞系HT22细胞暴露于0～100μmol/L醋酸铅24 h,采用噻唑蓝（MTT）法筛选适宜的铅作用剂量，建立铅暴露细胞模型。石墨炉原子吸收分光光度法（AAS）检测铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞铜水平变化；Western Blot法检测铅暴露对小鼠脑组织和HT22细胞中铜转运蛋白1（CTR1）、铜转运ATP酶α肽（ATP7A）、铜转运ATP酶β肽（ATP7B）表达水平的影响；2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法、硫代巴比妥酸比色法（TBA）分别测定铅暴露后HT22细胞内活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）活性变化情况，并观察特异性铜螯合剂四硫代钼酸铵（TTM）的保护作用。结果:与对照组相比，铅暴露组小鼠血铜水平降低，而皮质和海马组织铜水平均显著升高（P＜0.05）;以5、10μmol/L铅暴露24 h后，HT22细胞的铜吸收呈剂量-依赖性增高（P＜0.05）。铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞中CTR1蛋白水平显著增高，而ATP7A和ATP7B蛋白水平显著降低（P＜0.05）。铅暴露引起HT22细胞ROS、MDA水平较对照组呈剂量-依赖性升高（P＜0.05）;而TTM的处理逆转了铅暴露引起的氧化应激（P＜0.05）。结论:铅暴露可能通过影响神经元铜转运蛋白水平导致细胞铜蓄积，进而诱导细胞氧化应激损伤。
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