KLF2过表达及敲减胃癌稳转细胞株的建立

来源 :同济大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：wenliang729

【摘要】

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目的构建KLF2过表达BGC823和KLF2敲减MGC803胃癌稳转细胞株。方法克隆人源KLF2基因,连接到AgeI/AgeI酶切后GV358载体上,构建GV358 KLF2重组质粒,转染293T细胞,包装慢病毒;构

【作者】

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王春梅陈金联

【机构】

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同济大学附属东方医院消化内科,上海交通大学附属第六人民医院南院消化内科

【出处】

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同济大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2017年5期

【关键词】

：

KLF2基因稳转株敲减稳转 BGC823细胞 MGC803细胞

【基金项目】

：

上海市自然科学基金(16ZR1429100)

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目的构建KLF2过表达BGC823和KLF2敲减MGC803胃癌稳转细胞株。方法克隆人源KLF2基因,连接到AgeI/AgeI酶切后GV358载体上,构建GV358 KLF2重组质粒,转染293T细胞,包装慢病毒;构建KLF2shRNA,连接到BamHI和EcoRI双酶切后的PHBLV U6 ZSGreen Puro载体上,经鉴定后转染293T细胞。采用RT PCR及Western印迹法检测稳转细胞株中KLF2的表达。结果利用慢病毒介导,重组质粒GV358 KLF2和KLF2 shRNA转导入BGC823

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