【摘 要】
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目的研究伪狂犬病病毒(PrV)是否具有诱导组织培养细胞发生细胞凋亡的功能及探讨凋亡细胞核基质蛋白表达的变化.方法利用锥虫蓝(台盼蓝)染色绘制PrV在不同细胞上的增殖曲线;荧
【基金项目】
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国家科技攻关项目;湖北省自然科学基金
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目的研究伪狂犬病病毒(PrV)是否具有诱导组织培养细胞发生细胞凋亡的功能及探讨凋亡细胞核基质蛋白表达的变化.方法利用锥虫蓝(台盼蓝)染色绘制PrV在不同细胞上的增殖曲线;荧光染色观察凋亡细胞核的形态特征;琼脂糖凝胶电泳分析细胞染色体DNA的片段化;高分辨率双向电泳分析细胞凋亡前后核基质蛋白的表达差异. 结果膜通透性的DNA特异性结合染料Hoechst 33342染色显示,PrV感染后36 h,牛肾(MDBK)细胞核染色质开始固缩、凝聚,细胞核碎裂;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析表明,细胞染色体DNA发生片段化,形成"DNA梯状"条带(DNA ladder);尽管PrV可以诱导MDBK细胞发生细胞凋亡,但不能诱导IBRS-2,BHK-21及PK-15细胞发生凋亡.MDBK细胞发生凋亡前后核基质蛋白的表达发生改变,存在表达上调、下调、诱导表达及表达遏制等情况.结论PrV诱导细胞发生细胞凋亡是其致细胞死亡的形式之一,间接反映了PrV与宿主细胞间复杂的相互作用.细胞凋亡前后核基质蛋白表达存在的差异说明PrV致MDBK细胞发生凋亡是自身基因产物或诱导或抑制宿主细胞基因表达的结果.
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