纳豆激酶基因在大肠杆菌中活性表达的比较研究

来源 :微生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：usaend

【摘要】

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实现纳豆激酶基因(nattokinase gene)在大肠杆菌中高活性表达，并说明前肽(pro序列)对纳豆激酶的活性表达必不可少。以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板，采用PCR方法分别扩增煽码信

【作者】

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许芳冯建成李洁石衍君阎达中杨艳燕

【机构】

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湖北大学生命科学学院

【出处】

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微生物学杂志

【发表日期】

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2004年2期

【关键词】

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纳豆激酶基因大肠杆菌活性表达丝氨酸蛋白酶心脑血管疾病 nattokinase Escherichia coli active expression.

【基金项目】

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湖北省教育厅重点项目基金 ( 2 0 0 0A0 10 18) ,,湖北省自然科学基金 ( 2 0 0 3ABA116)资助

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实现纳豆激酶基因(nattokinase gene)在大肠杆菌中高活性表达，并说明前肽(pro序列)对纳豆激酶的活性表达必不可少。以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板，采用PCR方法分别扩增煽码信号肽、前肽及成熟肽的序列(pre-pro-NK)和煽码前肽、成熟肽的序列(pro-NK)，构建了大肠杆菌表达质粒pTYB101，pTYB102，转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下，分别在15℃(14h)，30℃(3h)和37℃(2h)培养。结果可见，pTYBl02能表达有活性的纳豆激酶。SDS-PAGE表明，

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