【摘 要】
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目的 探讨miR-92a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞自噬的影响及其可能的作用机制.方法 收集2016年1月至2018年12月贵州中医药大学第二附属医院收治的5
【机 构】
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550004贵阳,贵州医科大学医学检验学院临床微生物学及免疫学教研室;550004贵阳,贵州中医药大学第二附属医院检验科;550004贵阳,贵州省人民医院病理科;
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目的 探讨miR-92a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞自噬的影响及其可能的作用机制.方法 收集2016年1月至2018年12月贵州中医药大学第二附属医院收治的53例NSCLC患者的癌组织和癌旁肺组织标本,RT-PCR和免疫组化检测癌组织及癌旁组织内miR-92a、PTEN、p-PI3K、p-Akt和LC3-Ⅱ表达.将miR-92a-mimics(类似物)、miR-92a-NC(抑制剂对照)和miR-92a-inhibitor(抑制物)分别转染至A549细胞,48 h后吖啶橙染色检测细胞自噬,双荧光素酶报告实验验证miR-92a与PTEN的靶向关系,Weste blot检测各转染组细胞内PTEN、p-PI3K、p-Akt和LC3-Ⅱ的蛋白表达.结果 与癌旁肺组织比较,肺癌组织中miR-92a mRNA的表达显著升高(P＜0.001),p-PI3K、p-Akt阳性细胞率也显著升高(P＜0.001),PTEN、LC3-Ⅱ阳性细胞率显著降低(P＜0.001).miR-92a、PTEN和LC3-Ⅱ在不同性别、年龄中的表达差异无统计学意义(P＞0.05),在存在淋巴结转移、TNMⅢ～Ⅳ期及分化程度较低的病灶中,miR-92a高表达者显著多于无淋巴结转移、TNM Ⅰ～ Ⅱ期及分化程度较高的病灶(P＜0.01);在存在淋巴结转移、TNMⅢ～Ⅳ期及分化程度较低的病灶中,PTEN和LC3-Ⅱ高表达者显著低于无淋巴结转移、TNM Ⅰ～Ⅱ期及分化程度较高的病灶(P＜0.01).miR-92a-mimics组细胞啶橙染色荧光最弱,miR-92a-inhibitor组最强.3组中miR-92a-mimics组p-Akt、p-PI3K蛋白表达最高(P＜0.05),LC3-Ⅱ最弱(P＜0.05),miR-92a-inhibitor组p-Akt、p-PI3K蛋白表达最弱(P＜0.05),LC3-Ⅱ最强(P＜0.05).结论 miR-92a在非小细胞肺癌中通过靶向抑制PTEN表达,刺激PI3K/Akt信号通路活性,从而抑制细胞的自噬.
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