【摘 要】
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目的 探讨宫颈癌细胞中微RNA-429(miR-429)靶向调控p21活化蛋白激酶2(PAK2)对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 采用实时荧光定量技术(qRT-PCR)、免疫印迹法检测正常宫颈细胞
【机 构】
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郑州大学附属郑州中心医院妇产科 450000
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目的 探讨宫颈癌细胞中微RNA-429(miR-429)靶向调控p21活化蛋白激酶2(PAK2)对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 采用实时荧光定量技术(qRT-PCR)、免疫印迹法检测正常宫颈细胞Ect1/E6E7与宫颈癌HeLa、C33a、Caski细胞中miR-429与PAK2的表达.将宫颈癌Caski细胞分为miR-con组、miR-429组、si-con组、si-PAK2组、miR-429+pcDNA组、miR-429+pcDNA-PAK2组,MTT实验、体外迁移实验及侵袭实验检测各组细胞增殖、迁移及侵袭能力;免疫印迹法检测各组细胞中PAK2、Cyclin D1、MMP-2的表达.采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-429对PAK2的靶向调控作用.结果 miR-429在宫颈癌细胞系中的表达水平较正常宫颈细胞显著降低,而PAK2的表达水平显著升高;miR-429可靶向结合PAK2并负向调控其表达;上调miR-429表达或抑制PAK2表达后,细胞增殖活性明显降低,迁移及侵袭细胞数均明显减少,抑制Cyclin D1、MMP-2表达;上调miR-429表达与上调PAK2表达后,细胞增殖活性明显升高,迁移及侵袭细胞数均明显增加,促进Cyclin D1、MMP-2表达.结论 miR-429可通过负向调控PAK2的表达进而抑制宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力.
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