乙型肝炎病毒全长基因组的扩增

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目的:探讨扩增乙肝病毒全长基因组合适的PCR反应条件。方法:设计针对负链5’末端引物,PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因:改变PCR反应条件,决定最佳退火温度和最佳引物浓度,并观察不同乙肝病毒DNA模板量对PCR扩增效率的影响。结果:最佳退火温度为68%,最佳引物浓度为0、5umol/L,模板量在150拷贝以上能扩增出乙肝病毒全长基因.但模板量达到10^5拷贝抑制扩增效率。结论:退火温度为68%、引物浓度为0.5umol/L、乙肝病毒DNA模板量在150~10^5拷贝为乙肝病毒全长基因扩增的合适PCR反应条
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