【摘 要】
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目的:探讨miR-30c对鼻咽癌放疗敏感性的影响.方法:鼻咽癌放疗耐受细胞(CNE1)细胞分为3组:空白对照组,阴性对照组,mimic组;放疗敏感细胞(CNE2)细胞分为3组:空白对照组,阴性对照组,antagomic组.荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-30c表达水平,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡.Western blot检测蛋白表达.结果:CNE1细胞的空白对照组、阴性对照组和mimic组miR-30c的2-ΔΔCt值分别为0.165±0.037、0.162±0.035和0.4
【机 构】
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沧州市中心医院耳鼻喉科,河北沧州 061000
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目的:探讨miR-30c对鼻咽癌放疗敏感性的影响.方法:鼻咽癌放疗耐受细胞(CNE1)细胞分为3组:空白对照组,阴性对照组,mimic组;放疗敏感细胞(CNE2)细胞分为3组:空白对照组,阴性对照组,antagomic组.荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-30c表达水平,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡.Western blot检测蛋白表达.结果:CNE1细胞的空白对照组、阴性对照组和mimic组miR-30c的2-ΔΔCt值分别为0.165±0.037、0.162±0.035和0.463±0.064,CNE2细胞的空白对照组、阴性对照组和 antagomic 组的2-ΔΔCt值分别为0.323±0.045、0.326±0.047和0.204±0.038.CNE1 细胞 mimic 组 miR-30c的2-ΔΔCt值显著高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01),CNE2细胞antagomic组miR-30c的2-ΔΔCt值显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01).CNE1和CNE2细胞空白对照和阴性对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).CNE1细胞miR-30c的2-ΔΔCt值显著低于CNE2细胞(P＜0.01).CNE1细胞的空白对照组、阴性对照组和mimic组克隆形成率分别为(27.44±4.26)％、(27.25±4.21)％和(18.32±3.04)％,CNE2细胞的空白对照组、阴性对照组和antagomic组克隆形成率分别为(10.26±2.52)％、(10.22±2.47)％和(23.63±4.15)％.CNE1细胞mimic组克隆形成率显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01),CNE2细胞antagomic组克隆形成率显著高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01).CNE1和CNE2细胞空白对照和阴性对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).CNE1细胞的空白对照组、阴性对照组和mimic组细胞凋亡率分别为(8.16±1.31)％、(7.94±1.28)％和(28.46±4.17)％,CNE2细胞的空白对照组、阴性对照组和 antagomic 组细胞凋亡率分别为(33.16±5.42)％、(33.61±5.52)％和(20.14±3.26)％.CNE1 细胞mimic组细胞凋亡率显著高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01),CNE2细胞antagomic组细胞凋亡率显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01).CNE1和CNE2细胞空白对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).CNE1细胞的空白对照组、阴性对照组和mimic组LC3 Ⅱ蛋白的相对灰度值分别为0.684±0.107、0.676±0.113和0.184±0.034,CNE2细胞的空白对照组、阴性对照组和antagomic组LC3 Ⅱ蛋白的相对灰度值分别为0.112±0.023、0.108±0.021和0.376±0.045.CNE1细胞mimic组LC3 Ⅱ蛋白的相对灰度值显著低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01),CNE2细胞antagomic组LC3 Ⅱ蛋白的相对灰度值显著高于空白对照组和阴性对照组(P＜0.01).CNE1和CNE2细胞空白对照和阴性对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:miR-30c可以显著抑制鼻咽癌细胞放射线照射时自噬的激活,显著提高鼻咽癌细胞的放疗敏感性.
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