转基因大麦B-hordein基因荧光定量PCR方法的建立

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【摘要】

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为快速定量大麦贮藏蛋白基因B-hordein差异表达,利用SYBR Green I染料法测定转基因大麦和对照花后10 d籽粒B-hordein表达量,通过RT-PCR扩增B-hordein和内参基因actin片段,对P

【作者】

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李静雯张正英王立光陈军朱天地

【机构】

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甘肃省农业科学院生物技术研究所,甘肃省农业科学院作物研究所

【出处】

：

甘肃农业科技

【发表日期】

：

2020年11期

【关键词】

：

SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR 转基因大麦 B-hordein SYBR GreenⅠFluorescent quantitative PCRTrans

【基金项目】

：

国家自然科学基金(31660391、31460350)

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为快速定量大麦贮藏蛋白基因B-hordein差异表达,利用SYBR Green I染料法测定转基因大麦和对照花后10 d籽粒B-hordein表达量,通过RT-PCR扩增B-hordein和内参基因actin片段,对PCR退火温度、引物浓度等进行优化,结合扩增曲线和熔解曲线分析。结果表明,转基因大麦B-hordein基因表达量较对照品种Golden Promise显著降低(P<0.05),B-hordein和actin扩增片段分别在(84.51±0.01)℃和(80±0.01)℃

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