人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达及生物活性分析

来源 :首都医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:c546852942
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  提要:采用RT-PCR方法,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)cDNA,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1(+)真核表达载体上,成功构建了pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。MTT法检测结果表明:重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生。将重组质粒通过脂质体介导,体外转染至人肾细胞293细胞系进行表达,经C418筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性。此结果为研究IGF-1对血管内皮细胞作用的分子机制,以及利用ICP-1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础。
  关键词:人胰岛素样生长因子;基因克隆;基因表达
  中图分类号:Q785
其他文献
提要:回顾性分析我院35例胶原血管病(CVD)合并肺间质纤维化(PF)患者的临床资料。该组患者除有CVD病史或OVD相应特征外,突出的临床症状是胸闷、气短、咳嗽、咳痰,最常见的肺部体征为吸气末“velcro”性捻发音。胸片/胸部HRCT显示以双下肺野弥漫网结节影改变为主,部分患者可见胸膜增厚。肺功能改变以限制性通气功能障碍和弥散障碍为特征,血气分析提示低氧血症或轻度过度通气。类风湿性关节炎、进行性
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测定高胆红素血症新生儿32例和正常新生儿25例的血清β2微球蛋白(2—MG)的质量浓度。观察高胆红素血症对新生儿肾脏滤过功能的可能影响。
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提要:为探讨血清CAl25水平与子宫内膜癌临床分期、病理分级和分型的关系,用化学发光法检测子宫内膜癌患者术前血清CAl25水平。结果:随着子宫内膜癌临床期别的增高,血清CAl25水平及阳性率也增高;病理分级越差,血清CAl25水平及阳性率越高(P<0.05)。提示:CAl25水平对子宫内膜癌的分期、病理分级和分型有一定价值。  关键词:子宫内膜癌;血清CAl25化学发光测定  中图分类号:R737
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提要:为探讨产程中应用B超解决各种产科问题的实际价值,选择我科产房待产者共92人(孕周36周--41周+3d),用B超监测羊水、胎方位、胎儿生物物理图像等。结果显示应用B超检查胎方位较手法检查更方便和准确;B超检查发现羊水偏少者,孕周>41周、胎膜早破及胎儿生长迟缓(IUGR)者明显高于孕周<41周者(P<0.01);产程中胎儿生物物理图像与胎心监护结合进行,有利于提高胎儿宫内窘迫的阳性监测率,并
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提要:为观察连续性动静脉血液滤过(OAVH)用于肾移植后体内水钠潴留患者的疗效,对我院89例肾移植后体内水钠潴留患者行CAVH,使用床边P—21泵血滤机及膜面1.4m2聚砜膜透析器,使用低分子肝素抗凝,流速25~45mL/min。在血滤过程中,使用10%NaCl 10 mL,输白蛋白、全血、林格平衡液;监测心率、血压、液体出入量、细胞因子、移植肾功能、血气、胸片、电解质及酸碱平衡情况。追踪1~2年
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患者男,28岁。因腰酸3年,B超发现右肾上腺占位病变2周,于1998年4月收入我院收稿日期:2002-06-10内分泌科。患者3年前无明显诱因于劳累时出现腰酸,不伴有血尿。既往体健,无满月脸及高血压病史。
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提要:检测在缺氧预适应前后小鼠脑海马组织NDR2mRNA表达的变化,以探讨缺氧预适应对NDR2基因表达的影响及为研究该基因的功能提供线索。小鼠缺氧0次(H0)、1次(H1)、4次(H4)后取海马组织,应用半定量RT-PCR技术,检测NDR2mRNA的表达量的变化。结果H1和H4与H0相比,NnR2mRNA表达量显著升高,但H1和H4之间无明显差异。结果提示:缺氧以及预适应诱导NDR2基因的表达。 
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提要:为探讨缺氧复氧致原代培养的大鼠大脑皮质神经细胞凋亡中,Bax基因的表达及银杏叶提取物(EGB)对其的调节作用,用胎龄16-17dWlstar大鼠的大脑皮质神经细胞进行原代分离培养。采用原位末端标记法(TUNEL)透射电镜技术确立缺氧复氧神经细胞凋亡病理模型,并应用免疫组织化学方法显示缺氧复氧不同时间Bax基因的表达。结果:缺氧复氧可以使大鼠大脑皮质神经细胞发生凋亡,随缺氧时间的延长,凋亡细胞
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提要:为了在昆虫杆状病毒表达系统表达人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因,用Hind Ⅲ对pcDNA3.1/VEGF进行酶切,回收575bp的VEGF片段,与pFastBacI载体连接,得到含VEGF基因的转座载体pFast/VEGF,NcoI酶切鉴定方向;将其转化到含有穿梭载体杆粒(Bacmid)的DHl0Bac感受态细胞,得到重组杆状病毒穿梭载体BaCiTUd/VEGF,采用琼脂糖凝胶电泳、
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提要:回顾性分析16例瘤壁有钙化的颅内动脉瘤病例的影像学、临床资料及手术治疗,分析颅内血管钙化与颅内动脉瘤病理发生机制的关系。16例瘤壁有钙化的颅内动脉瘤的位置:后交通动脉3例,大脑中动脉2例,前交通动脉2例,椎动脉5例,基底动脉4例。其中14例动脉瘤直径>1.5cm,9例>2.5cm。所有病人的血钙、磷酸盐、血糖、肾功能正常;6例病人血脂增高。16例患者均施行动脉瘤夹闭术,其中8例术中切除动脉瘤
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