观察低能量633 nm红光照射人表皮细胞株HaCaT后，细胞增殖活性及细胞内活性氧水平的变化。
方法预实验选择照射距离。采用含体积分数10% FBS、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素的RPMI 1640培养液常规传代培养HaCaT细胞。采用第3代细胞进行以下实验。(1)取细胞，按随机数字表法分为空白对照组和0.082、0.164、0.245、0.491、1.472、2.453、4.910、9.810 J/cm2照射组，每组3孔。空白对照组细胞不照光，后8个照射组细胞依次照633 nm红光10、20、30、60、180、300、600、1 200 s，每8小时重复照射1次。照射组照射48 h(6次)后，9组均用细胞计数试剂盒8和酶标仪检测细胞增殖活性(以吸光度值表示)。(2)另取细胞，分组及照光方法同实验(1)，照射组照光1次后9组均加入活性氧检测试剂，常规培养60 min。分别于培养后0(即刻)、30、60、120 min，采用酶标仪检测细胞内活性氧水平(以吸光度值表示)。(3)另取细胞，按随机数字表法分为空白对照组，0.082、0.491、2.453、9.810 J/cm2照射组及阳性对照组。空白对照组和阳性对照组细胞不照光(阳性对照组另加入活性氧阳性对照试剂)，照射组细胞按实验(1)方法照光1次。激光扫描共聚焦显微镜观察各组细胞内活性氧表达。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、t检验。
结果(1)照射距离为10 cm。空白对照组以及0.082、0.164、0.245、0.491、1.472、2.453、4.910、9.810 J/cm2照射组细胞增殖活性分别为1.000、1.116±0.031、1.146±0.016、1.162±0.041、1.179±0.016、1.207±0.016、1.247±0.040、1.097±0.059、0.951±0.118。与空白对照组比较，0.082～2.453 J/cm2照射组细胞增殖活性明显增强(t值为－22.803～－6.779，P值均小于0.05)。4.910、9.810 J/cm2照射组细胞增殖活性与空白对照组相近(t值分别为－2.854、0.711，P值均大于0.05)。(2)培养后0、30 min，与空白对照组比较，0.164～2.453 J/cm2照射组细胞内活性氧水平明显增高(t值为－12.453～－4.684，P<0.05或P<0.01)，0.082、4.910、9.810 J/cm2照射组细胞内活性氧水平无明显变化(t值为－3.925～－0.672，P值均大于0.05)。培养后60 min，与空白对照组比较，0.082～2.453 J/cm2照射组细胞内活性氧水平明显增高(t值为－11.387～－4.717，P<0.05或P<0.01)。培养后120 min，与空白对照组比较，0.491～2.453 J/cm2照射组细胞内活性氧水平明显增高(t值为－10.657～－6.644，P<0.05或P<0.01)。(3)与空白对照组比较，0.082、0.491、2.453 J/cm2照射组和阳性对照组细胞内活性氧的表达均增强。9.810 J/cm2照射组细胞内活性氧的表达较其他照射组明显减弱。各组细胞内活性氧均表达于线粒体中。
结论低能量633 nm红光照射对人表皮细胞株HaCaT增殖具有促进作用，该促进作用与红光照射刺激细胞线粒体产生活性氧关系密切。