【摘 要】
：
目的 研究骨髓基质干细胞体外诱导分化,结合特异性GFAP启动子控制的EGFP的表达来筛选诱导的骨髓基质干细胞.方法构建报告载体pGFAP-EGFP,原代培养的骨髓基质干细胞,在β-ME、RA、forskolin、bFGF、PDGF-AA、HRG-β等复合物的诱导7d后,pGFAP-EGFP载体转染,G418抗生素筛选.荧光显微镜下观察存活细胞体内的EGFP表达情况,流式细胞仪测定荧光细胞的比率.结
【机 构】
：
100044,北京大学人民医院创伤骨科,100044,北京大学人民医院创伤骨科,100044,北京大学人民医院创伤骨科,100044,北京大学人民医院创伤骨科,100044,北京大学人民医院创伤骨科,
论文部分内容阅读
目的 研究骨髓基质干细胞体外诱导分化,结合特异性GFAP启动子控制的EGFP的表达来筛选诱导的骨髓基质干细胞.方法构建报告载体pGFAP-EGFP,原代培养的骨髓基质干细胞,在β-ME、RA、forskolin、bFGF、PDGF-AA、HRG-β等复合物的诱导7d后,pGFAP-EGFP载体转染,G418抗生素筛选.荧光显微镜下观察存活细胞体内的EGFP表达情况,流式细胞仪测定荧光细胞的比率.结果报告载体pGFAP-EGFP构建成功,转染骨髓基质干细胞后部分细胞存活,流式细胞仪测定82.74%的细胞表达EGFP.筛选出的细胞GFAP免疫细胞化学鉴定阳性.体外扩增后可以得到大量的目的细胞.结论特异性GFAP 启动子控制的EGFP的表达可以在体外有效的进行骨髓基质干细胞的筛选和扩增.筛选后的细胞具有胶质细胞表型,可提供足够的胶质细胞进行神经系统的细胞替代治疗。
其他文献
目的 观察树突状细胞(DC)对异种抗原的免疫递呈作用,并探讨未成熟DC对T细胞的免疫调节作用.方法从BALB/c小鼠骨髓诱生未成熟DC及成熟DC.将DC与小鼠T细胞进行混合淋巴细胞培养(MLC)作为异种移植体外模型,以胰岛细胞作为靶细胞检测细胞毒效应.结果 MLC结果表明保留DC组及体内、外致敏成熟DC组刺激指数(SI=2.09,3.91,2.81)与去除DC组(SI=1.09)相比差异有显著性.
为探讨梗阻性黄疸对胆管愈合的影响,我们通过建立动物模型,从瘢痕形成的角度来观察分析,现报道如下。
内分泌系统是机体应激时十分重要的调控系统之一,创伤、感染等外部打击以及体内免疫、炎症甚至心理等内在因素改变都可以引起神经内分泌系统的变化.内分泌系统可进一步广泛的参与机体代谢、免疫、炎症、凝血等众多方面的调节过程,在脓毒症的发生发展中具有重要作用。
本研究旨在观察腹外斜肌筋膜原位修补腹股沟疝的效果,现将结果报道如下. 一、临床资料 1.一般资料:本组22例中,男18例,女4例.年龄19～65岁,平均年龄32.5岁.其中腹股沟斜疝18例,直疝4例.均为择期手术.
目的 研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)移植对周围神经再生的作用.方法将40只SD大鼠随机分为4组,每组10只,切除3 mm右侧坐骨神经并用硅胶管套接修复,管内分别给予生理盐水、体外培养纯化的OECs、GDNF和OECs-GDNF基因工程细胞,术后6周,分别行电生理、组织学检查和辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,观察各种处理对神经元存活和纤维再生的影响.结果术后
纳米技术是指对1～100nm尺度范围内对物质和材料进行研究处理的技术.纳米尺度下的物质世界及其特性是人类较为陌生的领域,也是一片新的研究疆土,在这种尺度下,有许多新现象、新规律有待发现,这也是新技术发展的源头;纳米科技是多学科交叉融合性质的集中体现,而现代科技的发展几乎都是在交叉和边缘领域取得创造性突破.当微粒小于100nm时,物质的很多性能将发生质变,从而呈现不同于宏观物质的奇异现象"低熔点、高
目的 建立无心跳供体肺移植的模型,探讨无心跳供体肺应用于肺移植的可能性.方法 60只健康SD大白鼠,随机分成3组:1组为有心跳供体组;2组为无心跳供体-热缺血30 min组;3组为无心跳供体-热缺血60min组.供肺置于4℃低钾右旋糖苷(LPD)液中4h.受体鼠行左侧开胸术和原位左肺移植术.术后维持辅助呼吸1 h,阻断右肺门.结果 2组与1组相比,受体存活时间、移植后肺顺应性、超微结构、粒细胞浸润
生物瓣具有良好的血液动力学效应;细菌不易附着,感染发生率低;术后不需抗凝治疗,特别适用于65岁以上和不宜使用抗凝药物的患者等优点,因此临床实践中得以被广泛采用.然而,无论是同种瓣还是异种瓣,由于异体细胞表达一定的抗原性,特别是内皮细胞(ECs)具有强烈的免疫原性,生物瓣容易发生钙化及衰败.如何保持生物瓣膜结构与功能的完整性,提高耐久性,同时又减低免疫原性所引起的衰败率,已成为现今国内外研究的热点。
血管和瓣膜内皮细胞种植面临的重要问题之一是提高内皮细胞和细胞外基质(ECM)的黏附力.剪切力环境下培养内皮细胞是改善心脏瓣膜和血管的内皮细胞种植效果的主要方法之一.本文旨在对近几年剪切力促进内皮细胞黏附的整合素信号传导途径和临床基础研究两方面进行综述,探讨体外培养内皮细胞时合适的剪切力指标。