探讨EV71阳性手足口病患儿外周血Th17、CD4+CD25+Treg、HLA-DR mRNA的表达及临床意义。
方法采用分层随机抽样的方法选取2014年2至10月山东省聊城市人民医院收治的手足口病患儿60例,其中普通组、重症组和危重症组各20例,并选择同期在本院体检的20名儿童作为健康对照组。所有患儿均使用利巴韦林(10 mg/kg)抗病毒治疗。采用流式细胞术检测外周血Th17和CD4+CD25+Treg的表达,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HLA-DR mRNA的表达。采用方差分析和SNK-q检验比较各组间Th17、CD4+CD25+Treg以及HLA-DR mRNA的表达,并采用Pearson法分析HLA-DR mRNA表达与外周血Th17和CD4+CD25+Treg表达的相关性。
结果与健康对照组比较,治疗第1天时,手足口病患儿外周血Th17表达升高(F=310.4,P<0.01),CD4+CD25+Treg和HLA-DR mRNA表达下降(F=81.5和545.4,P<0.01)。经过治疗,普通组、重症组和危重症存活组Th17逐渐下降,CD4+CD25+Treg和HLA-DR mRNA水平上升,但危重症死亡组患儿外周血Th17水平却升高,CD4+CD25+Treg和HLA-DR mRNA水平下降。治疗第10天时,普通组、重症组、危重症存活组的Th17和CD4+CD25+Treg水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但危重症死亡组Th17水平仍进行性升高,CD4+CD25+Treg水平继续下降,与存活组相比差异有统计学意义(t=16.4和12.0,P<0.05);普通组和重症组HLA-DR mRNA水平与健康对照组相比差异无统计学意义,危重症存活组HLA-DR mRNA水平虽然呈上升趋势,但与普通组和重症组相比存在统计学差异(P<0.05),不过明显高于危重症死亡组水平(t=7.8,P<0.05)。Pearson相关性分析发现,HLA-DR mRNA水平与Th17水平呈负相关(r=-0.770,P<0.01),与CD4+CD25+Treg水平呈正相关(r=0.883,P<0.01)。
结论外周血Th17、CD4+CD25+Treg、HLA-DR mRNA的表达与手足口病的严重程度密切相关,可作为判断手足口病患儿病情的严重程度及预后的指标。