墨兰ISSR-PCR反应体系建立及优化

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为建立墨兰的ISSR-PCR反应体系,采用正交试验分析了5个因素(Tag酶浓度、Mg2+浓度、模板DNA浓度、引物浓度、dNTP浓度)在4个水平上对 ISSR -PCR反应的影响。结果表明:Tag 酶浓度为1.6U/25μL、Mg2+浓度为2.4mmol/L、dNTP浓度0.96 mmol/L、Primer浓度为0.64μmol/L、DNA 浓度3.2ng/25μL是墨兰ISSR-PCR最优反应体系。
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