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以pBE-DFE质粒为模板，采用反向长距离PCR技术对豆豉纤溶酶（Douchi Fibrinolytic Enzyme，DFE）基因进行定点突变，使位于酶的底物结合区第156位的谷氨酸和第166位的甘氨酸分别替换为丝氨酸和丙氨酸，使临近酶的底物结合区的第169位甘氨酸残基替换为丙氨酸，获得了三个突变体E156S，G166A和G169A．将含突变基因的表达载体转化枯草杆菌WB800，构建了豆豉纤溶酶基因突变体的表达菌株WB800（E156S）；WB800（G166A）和WB800（G166A）．将3种表达菌