去C末端JAK3基因重组逆转录病毒载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

来源 :四川省卫生管理干部学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whimco1984
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目的:构建去C末端Jak3重组逆转录病毒载体,获得能稳定产生去C末端Jak3基因的重组逆转录病毒的细胞株,为利用去C-末端Jak3对白血病进行基因治疗的实验研究打基础.方法:用限制性内切酶从质粒PcJak3(△C)中切出目的基因并从凝胶中回收该目的基因片段,连接到逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点上构建重组逆转录病毒载体PL Jak3(△C),通过转化感受态细菌后氨卞青霉素筛选、酶切及DNA测序鉴定;用脂质体LIPOFECTAMINE转染包装细胞PA317细胞并用G418筛选抗性细胞,转染的包装细胞包装出
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