羊奶粉生产中金黄色葡萄球菌分离鉴定及其分子特性和耐药性检测

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为探究羊奶粉在加工过程中金黄色葡萄球菌污染的关键环节及菌株的分子特征和耐药性,对某羊奶粉加工厂不同生产环节进行样本收集,通过采用选择培养和聚合酶链式反应扩增nuc基因对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,然后对分离的菌株进行毒素基因(21种)、耐药性(16种常用抗生素)及葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophpresis,PFGE)分型研究.结果 表明,收集的112份样本中有6份样本被污染(5.4%,6/112),其中包括加工设备(2份)、加工人员(2份)、罐奶(1份)和车间落地粉(1份).所有的分离株至少携带1种毒素基因,其中以pvl基因的携带率最高(100.0%,6/6),其次为sea、sec、see、seh、sek和seq(50.0%,3/6),seg、sej和ser (33.3%,2/6),sed、sei、sem和seo(16.7%,1/6).所有分离株至少耐受4种抗生素,其中对氨苄西林、头孢哌酮、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑和青霉素的耐药性最为普遍(100.0%,6/6),其次为红霉素和阿莫西林/克拉维酸(83.3%,5/6)、四环素(50.0%,3/6)和庆大霉素(16.7%,1/6).此外,所有菌株对苯唑西林、头孢西丁、万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感.所有分离株共有4种SPA分型和3种ST分型,其中以ST1-t127 (50.0%,3/6)为主,其次为ST5-t002、ST5-t548和ST188-t189(16.7%,1/6).对于PFGE分型,可分为3个大簇(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ簇)和4个基因型(A、B、C和D),其中加工设备和落地粉存在相同的PFGE分型.研究结果表明在羊奶粉加工过程中存在金黄色葡萄球菌污染现象,罐奶、加工设备、加工人员和落地粉是受污染的关键环节,且在不同的加工环节中存在一定的交叉污染.虽然污染率较低,有必要对奶厂不同加工环节的污染情况进行长期调查,确认关键污染环节,可以有效控制金黄色葡萄球菌在奶粉制品中的扩散.
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