【摘 要】
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目的:探讨β-arrestin1对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞线粒体内活性氧含量(ROS)的影响及可能作用机制.方法:构建稳定敲低β-arrestin1(Siβ1)的T-ALL细胞株Jurkat细胞.采用流式细胞术、探针法分别检测细胞及线粒体内ROS含量.microRNA芯片检测及分析和Q-PCR验证β-arrestin1与microRNA的关系.miRbase软件预测microRNA靶基因,Western blot检测microRNA靶基因表达,双荧光素酶报告基因实验验证结合.结果:成功构建J
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心,重庆400014;国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,重庆400014;儿童发育疾病研究教育部重点实验室,重庆400014;儿科学重庆市重点实验室,重庆400
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目的:探讨β-arrestin1对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞线粒体内活性氧含量(ROS)的影响及可能作用机制.方法:构建稳定敲低β-arrestin1(Siβ1)的T-ALL细胞株Jurkat细胞.采用流式细胞术、探针法分别检测细胞及线粒体内ROS含量.microRNA芯片检测及分析和Q-PCR验证β-arrestin1与microRNA的关系.miRbase软件预测microRNA靶基因,Western blot检测microRNA靶基因表达,双荧光素酶报告基因实验验证结合.结果:成功构建Jurkat Siβ1稳定细胞株,Jurkat Siβ1整个细胞水平ROS含量略降低,且线粒体内ROS含量明显降低.mi-croRNA芯片分析发现,多种与T-ALL相关的microRNA呈差异表达,其中miR-652-5p在Jurkat Siβ1中的表达显著升高(P <0.05 fold >2.0),且Q-PCR显示miR-652-5p在Jurkat Siβ1中上升近5倍;通过miRbase软件预测到P62基因是miR-652-5p靶基因,且其能调控线粒体功能,在miR-652-5p稳定敲低Jurkat细胞中高表达,双荧光素酶报告基因实验证实P62是miR-652-5p靶基因.结论:T-ALL中,β-arrestin1可降低miR-652-5p表达,解除对P62基因的抑制,增加细胞线粒体内ROS含量.
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目的:研究新型高选择性磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对白血病细胞L1210和K562增殖抑制的作用.方法:采用CCK-8法检测ZL-n-91对L1210和K562细胞增殖的影响,并计算增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);PE单染法检测ZL-n-91对L1210和K562细胞周期的影响;PE/7AA-D双染法检测ZL-n-91对L1210和K562细胞凋亡的影响;Western blot检测ZL-n-91对K562细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响;构建急性淋巴细胞白血病L1210裸鼠皮下移植瘤模型,观察口
背景糖尿病肾病早期发病隐匿,多数患者在诊断时肾脏已发生不可逆性损害,早期诊断和治疗对于阻止或者延缓糖尿病肾病的发生、发展具有重要作用,构建一个简单、有效的个性化风险预测模型可为糖尿病肾病的早期诊断和治疗提供重要参考。目的分析影响2型糖尿病(T2DM)患者发生微量白蛋白尿(MAU)的独立危险因素,构建一个简单、有效的个性化临床预测模型,预测T2DM患者发生MAU的风险。方法选取2014年3月至201
目的:构建耐阿糖胞苷(Ara-C)的急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药细胞株,并探讨可能耐药机制.方法:低浓度Ara-C持续诱导培养Jurkat和Nalm-6细胞,构建Jurkat/Ara-C和Nalm-6/Ara-C耐药细胞株.CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期分布,实时荧光定量PCR检测多药耐药基因和Ara-C代谢酶mRNA表达水平,免疫印迹法检测细胞周期蛋白表达水平.结果:成功构建了Jurkat/Ara-C和Nalm-6/Ara-C耐药细胞株,耐药指数分别为1973.908±161.
目的 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)引起的慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)破坏了体内氧化和抗氧化物质之间的平衡,还可能导致系统性炎症.本研究观察合并勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的男性OSAHS患者性激素水平与氧化应激、系统性炎症的相关性.方法 通过多导睡眠(polysomnography,PSG)监测入选48例男性OSAHS患者
背景营养不良作为帕金森病的非运动症状之一,长期以来未受到足够的重视。营养不良、肌肉减少、平衡障碍有可能增加帕金森病患者的骨折风险,目前国内关于这方面的研究相对较少。目的分析不同性别帕金森病患者营养状况、身体成分、平衡状况与骨折风险的相关性。方法选取2018年12月至2020年12月就诊于郑州大学附属洛阳中心医院的68例帕金森病患者为研究对象,其中男37例,女31例。收集患者一般资料,采用骨折风险预
目的:采用混合谱系白血病(MLL)-AF9转基因小鼠造血细胞移植的方法建立白血病小鼠模型,为急性髓系白血病的机制研究和治疗药物筛选提供基础.方法:繁育和鉴定MLL-AF9转基因小鼠,当小鼠自然发病后,经外周血白细胞计数检测、流式细胞术和形态学方法鉴定.待外周血白细胞数>100×109/L后,收集骨髓细胞和脾细胞冻存.将细胞复苏后经尾静脉注射入4.5 Gy照射的野生C57BL/6J小鼠体内,观察小鼠的成模情况,最后采用阳性药物在该模型上进行疗效评价.结果:本实验繁育的MLL-AF9转基因小鼠的自然发病时间为
目的:探讨自噬活性对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞中铁死亡发生的影响及其机制.方法:MTS法和台盼蓝染色法分别检测ALL细胞系(Reh、Jurkat、CCRF-CEM)细胞活力及细胞死亡情况;Western blot法检测ALL细胞自噬相关蛋白p62、LC3Ⅰ/Ⅱ及铁蛋白(Ferritin)的表达;流式细胞术检测ALL细胞内不稳定铁池(LIP)的水平变化.结果:Reh细胞对铁死亡激活剂Erastin反应敏感,而Jurkat、CCRF-CEM细胞对Erastin反应抵抗.自噬激活剂雷帕霉素可增加Jurka
背景脂肪因子与体脂分布及糖脂代谢的相关性研究已成为国内外研究热点,而脂肪因子Asprosin、Spexin在2型糖尿病(T2DM)及肥胖中的研究鲜有报道。目的探究血清Asprosin、Spexin水平与T2DM并发内脏型肥胖(VO)的相关性。方法选取2019年1月至2020年6月于内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院内分泌科国家标准化代谢性疾病管理中心就诊的381例T2DM患者为研究对象。依据是否
目的 探讨血小板在儿童手足口病中的诊断价值及与肠道病毒71型(EV71)的相关性.方法 选择60例手足口病患儿作为手足口组,依照EV71检测结果不同分为EV71阳性组(38例)和EV71阴性组(22例);另选取同期体检的60例健康儿童作为健康组.所有儿童均进行血液常规检测,比较手足口组和健康组平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板计数(PLT)、白细胞计数(WBC)及其与手足口病严重程度的相关性;比较EV71阳性组与EV71阴性组的性别、年龄、MPV、PDW、PLT、WBC及其与EV7
目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者中RUNX1基因及其伴随基因突变的发生率,并分析其临床特征及预后.方法:采用基因组DNA-PCR方法扩增RUNX1基因外显子,应用基因测序分析其基因突变,同时检测NPM1、DNMT3A、FLT3-ITD、IDH1/2、K/N-RAS、CEPBA、TET2、WT1伴随突变的情况,随访患者并判定疗效和预后.结果:171例AML患者中,17例检测存在RUNX1基因突变,突变率为9.9%.RUNX1基因突变类型为错义突变9例,框移突变4例,无义突变4例,突变组患者初诊时外周血