【摘 要】
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目的:研究人结核分枝杆菌侵入抗原提呈细胞后诱导树突细胞(DC)成熟的机制。方法:选择小鼠DC2.4细胞株为抗原提呈细胞的效应细胞,建立人结核分枝杆菌H37Rv株的细胞混合培养模
【基金项目】
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浙江省大学生科技创新活动计划(2012R417010);嘉兴市科技计划(2011AY1048-2)
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目的:研究人结核分枝杆菌侵入抗原提呈细胞后诱导树突细胞(DC)成熟的机制。方法:选择小鼠DC2.4细胞株为抗原提呈细胞的效应细胞,建立人结核分枝杆菌H37Rv株的细胞混合培养模型。在不同混合培养时段,采用实时荧光定量PCR检测DC2.4细胞Toll样受体2(TLR2)、TLR4 mRNA的表达量;蛋白质印迹法检测DC的核因子κB(NF-κB)p65蛋白的表达;免疫酶联吸附试验定量检测DC产生α肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平;采用间接免疫荧光法和流式细胞术检测DC2.4表面CD80和CD86的表达情况。结果:H37Rv与DC2.4共培养2 h后开始有细菌侵入;共培养6、8、10、12 h后,细菌侵入率分别为(37.9±5.6)%、(51.2±7.6)%、(57.2±8.9)%、(63.9±12.4)%;TLR2、TLR4 mRNA也开始增量,共培养10 h时达高峰,之后开始下降;共培养6 h时,NF-κB p65的表达量明显增高;TNF-α的表达量在共培养6 h开始上调,8 h时达高峰,随后逐渐下降;共培养6 h时,DC2.4表面CD80、CD86表达量明显增高。结论:人结核分枝杆菌侵入DC2.4时,通过激活TLR2/4-NF-κB信号通路,诱导DC成熟,提高其抗原提呈能力。
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