探讨Th17/Treg细胞失衡在儿童再生障碍性贫血(AA)免疫发病及治疗过程中的意义。
方法选取2012年1月至2013年10月在安徽医科大学第二附属医院收治的AA患儿43例(其中男14例)，年龄2～14岁，根据AA患儿初诊时疾病严重程度分为2组：重型AA(SAA，25例，其中男8例，年龄2～14岁)和非重型AA(NSAA，18例，其中男6例，年龄2～14岁)。随着治疗的进行，根据临床实际情况制定3个监测时间点：初诊(43例，其中男14例，年龄2～14岁)，脱离输血(8例，其中男5例，年龄2～11岁)和完全缓解(6例，其中男3例，年龄2～11岁)，以同期治疗无效的AA患儿作为无效对照(脱离输血无效对照，5例，其中男1例，年龄3～8岁；完全缓解无效对照，4例，其中男2例，年龄4～11岁)。采用流式细胞术检测各研究对象外周血中Treg及Th17细胞占CD4＋T细胞的比例，并计算Th17/Treg；酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测初诊AA患儿血浆中白细胞介素(IL)－17和IL－6水平。并检测本院同期25名(其中男12名，年龄3～14岁)健康体检儿童外周血中Treg及Th17细胞比例及血浆中IL－17和IL－6水平作为健康对照，以同期9例(其中男4例，年龄1～11岁)化疗后AA状态患儿各项指标作为初诊对照组。采用t检验或ANOVA分析及Mann－Whitney U或Kruskal－Wallis H检验进行组间比较；相关性分析采用Spearman相关系数分析。
结果(1)初诊AA患儿外周血中Th17细胞比例1.63%(1.27%，2.48%)高于健康对照组0.40%(0.35%，0.51%)和初诊对照组0.50%(0.45%，0.75%)；Treg细胞比例4.24%(3.10%，5.29%)低于正常对照组7.03%(6.56%，7.48%)和初诊对照组7.50%(6.60%，8.30%)；同时Th17/Treg 0.53(0.34，0.69)高于正常对照组0.06(0.05，0.07)和初诊对照组0.09(0.08，0.11)；差异均有统计学意义(P均<0.01)。(2)初诊AA患儿血浆中的IL－17和IL－6均高于正常对照组[(223±92)比(116±18)ng/L，(26.2±12.0)比(10.6±2.1)ng/L，P均<0.01]。初诊AA患儿IL－17和IL－6水平均与Th17细胞比例成正相关(r＝0.62、0.64，P均<0.01)。(3)SAA患儿外周血中Th17细胞比例、Th17/Treg、IL－17及IL－6均高于正常对照组[1.80%(1.25%，2.61%)比0.40%(0.35%，0.51%)，0.57%(5.10%，0.82%)比0.06%(0.05%，0.07%)，(225±108)比(116±18)ng/L，(25.9±12.6)比(10.6±2.1)ng/L，P均<0.01]；NSAA患儿外周血中Th17细胞比例、Th17/Treg、IL－17及IL－6均高于正常对照组，但SAA及NSAA患儿的Treg细胞比例均低于正常对照组(P均<0.01)。SAA与NSAA患儿之间的Th17及Treg细胞比例、Th17/Treg、IL－17及IL－6水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。(4)不同治疗阶段(初诊、脱离输血、完全缓解、脱离输血无效对照、完全缓解无效对照)AA患儿Th17细胞比例和Th17/Treg差异均有统计学意义(P均<0.05)，Treg比例差异均无统计学意义(P均>0.05)。
结论AA患儿外周血中存在Th17/Treg细胞失衡及TH17细胞相关因子异常增多现象，但对初诊AA的严重程度无明显影响。经免疫抑制治疗后，随着Th17/Treg失衡的纠正，AA得到逐步缓解。