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本文建立了冷冻聚丙烯酰胺包埋固定化微生物的方法，并用于固定化黑曲霉生产柠檬酸，与常规方法进行了比较。优化了固定化细胞生产柠檬酸的条件：蔗糖浓度１００～１４０ｇ／Ｌ，ＮＨ４Ｃｌ３．０～４．０ｇ／Ｌ初始ｐＨ３．０，培养温度３０℃。固定化细胞在半连续发酵中重复使用５批次，在连续发酵中使用３００ｈ，其余酸活性没有明显下降。