【摘 要】
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目的通过小干扰RNA沉默检测DDX39基因对肾透明细胞癌增殖的影响及其相关机制。方法应用脂质体转染法将DDX39-siRNA转染人肾透明细胞癌786-O细胞,试验设空白对照组、阴性对照
【机 构】
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同济大学附属第十人民医院检验科,同济大学附属杨浦医院检验科
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目的通过小干扰RNA沉默检测DDX39基因对肾透明细胞癌增殖的影响及其相关机制。方法应用脂质体转染法将DDX39-siRNA转染人肾透明细胞癌786-O细胞,试验设空白对照组、阴性对照组、小干扰RNA转染组(DDX39-siRNA)。应用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测DDX39-siRNA的干扰效率;MTT法和平板克隆形成实验检测DDX39对786-O细胞增殖的影响;Western印迹法检测细胞增殖指标PCNA;流式细胞术检测DDX39-siRNA干扰后786-O细胞周期的变化。结果与阴性对照组相比,转染DDX39-siRNA后,786-O细胞中DDX39 mRNA及其蛋白的表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);DDX39-siRNA干扰后786-O细胞增殖能力受到抑制,克隆形成能力明显下降;S期细胞减少,G2/M期细胞百分比明显增加(P<0.05)。结论 DDX39敲减后可显著抑制肾癌细胞786-O细胞增殖,并阻滞细胞于G2/M期。
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