【摘 要】
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[背景]木霉菌遗传转化方法的烦琐复杂限制了对其基因克隆、基因功能的研究.[目的]建立深绿木霉HB20111便捷、高效的遗传转化体系.[方法]利用镁硅酸盐纳米粘土作为载体吸附含有荧光蛋白基因gfp的丝状真菌表达载体pCAMBIA1303-gpdA-GFP-TrpC-Hygro,形成质粒-镁硅酸盐纳米粘土复合物,在超声条件下对深绿木霉HB20111分生孢子进行遗传转化.[结果]当分生孢子浓度为106 CFU/mL、分生孢子悬液培养12 h、镁硅酸盐纳米粘土浓度100 mg/L和超声处理30 s(输出功率为10
【机 构】
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齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院,山东济南250353;齐鲁工业大学(山东省科学院)生态研究所山东省应用微生物重点实验室,山东济南250103;齐鲁工业大学(山东省科学院)生态研究所山东省应用
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[背景]木霉菌遗传转化方法的烦琐复杂限制了对其基因克隆、基因功能的研究.[目的]建立深绿木霉HB20111便捷、高效的遗传转化体系.[方法]利用镁硅酸盐纳米粘土作为载体吸附含有荧光蛋白基因gfp的丝状真菌表达载体pCAMBIA1303-gpdA-GFP-TrpC-Hygro,形成质粒-镁硅酸盐纳米粘土复合物,在超声条件下对深绿木霉HB20111分生孢子进行遗传转化.[结果]当分生孢子浓度为106 CFU/mL、分生孢子悬液培养12 h、镁硅酸盐纳米粘土浓度100 mg/L和超声处理30 s(输出功率为100 W/cm2,发射频率为50 kHz)条件下对深绿木霉HB20111的转化效率最高,可以达到124个转化子/μg-DNA.[结论]使用镁硅酸盐纳米粘土作为载体可以实现对深绿木霉HB20111便捷、高效的遗传转化,转化子抗性基因和报告基因可以稳定遗传.
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