【摘 要】
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重组抗体相较于多克隆抗体和杂交瘤单克隆抗体具有更好的稳定性和特异性,本研究以弓形虫表面抗原1(surface antigen 1,SAG1)为靶标制备了重组抗体。将弓形虫SAG1(45~198aa)的基因序列被克隆到pET-32a原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后获得弓形虫SAG1(45~198aa)重组蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后通过皮下注射免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,制备SAG1单克隆杂交瘤。通过兼并引物克隆杂交瘤抗体的重链和轻链序列得到重组抗
【机 构】
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浙江大学动物科学学院浙江大学动物预防医学研究所浙江省动物预防医学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31672543),浙江省“三农六方”科技协作计划资助项目(2020SNLF007),浙江省重大科技专项重点农业资助项目(2012C2009-2)。
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重组抗体相较于多克隆抗体和杂交瘤单克隆抗体具有更好的稳定性和特异性,本研究以弓形虫表面抗原1(surface antigen 1,SAG1)为靶标制备了重组抗体。将弓形虫SAG1(45~198aa)的基因序列被克隆到pET-32a原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后获得弓形虫SAG1(45~198aa)重组蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后通过皮下注射免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,制备SAG1单克隆杂交瘤。通过兼并引物克隆杂交瘤抗体的重链和轻链序列得到重组抗
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