【摘 要】
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为了建立永生化的犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)株,为其在基础研究方面的应用创造方便快捷的途径,本试验将构建好的pLOX-Ttag-iresTK慢病毒载体包装后感染cBMSCs,连续培养传至5
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵712100
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为了建立永生化的犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)株,为其在基础研究方面的应用创造方便快捷的途径,本试验将构建好的pLOX-Ttag-iresTK慢病毒载体包装后感染cBMSCs,连续培养传至50代,通过细胞形态观察、细胞计数、RT-qPCR基因表达分析、Western blot、流式细胞术以及三系分化鉴定永生化cBMSCs.结果 显示,永生化cBM-SCs形态呈长梭状,生长曲线呈“S”型,且相对于野生型增殖较快,可成功表达SV40T;具有BMSCs特异性表面标志,并可诱导分化为成骨细胞、成软骨细胞和成脂肪细胞.因此,可以通过SV40来建立永生化细胞株,所得到的SV40-cBMSCs有较为良好的生长状态,其符合永生化细胞特征,为后续cBMSCs在试验研究方面的运用奠定基础.
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