【摘 要】
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观察芳香新塔花总黄酮对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠自噬和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的调控,探讨芳香新塔花总黄酮抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用机制。ApoE-/-小鼠喂食高脂饲料8周,建立体内AS实验模型,随机分为5组(模型组、阳性对照组及芳香新塔花总黄酮低、中、高剂量组),普通饲料喂食C
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81960853); 国家中医药管理局青年岐黄学者支持项目(国中医药人教函(2020)218);
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观察芳香新塔花总黄酮对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠自噬和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的调控,探讨芳香新塔花总黄酮抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用机制。ApoE-/-小鼠喂食高脂饲料8周,建立体内AS实验模型,随机分为5组(模型组、阳性对照组及芳香新塔花总黄酮低、中、高剂量组),普通饲料喂食C57BL/6J小鼠设为空白组。灌胃给药12周后取出血清和主动脉,全自动生化分析仪检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、血管间黏附因子-1(VCAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平;油红O染色法观察小鼠主动脉斑块面积;苏木精-依红(HE)染色法观察小鼠主动脉斑块及病理变化;免疫荧光法检测主动脉中P62、LC3的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠主动脉中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、P62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果显示,与空白组相比,经高脂饮食喂食8周建立的模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、VCAM-1、ICAM-1、MMP-2、MMP-9含量明显升高(P<0.01),HDL-C含量明显降低(P<0.01),主动脉内斑块面积显著增加(P<0.01),LC3的表达量明显下调,P62的表达量明显上升(P<0.01或P<0.05),主动脉裂解液中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达量明显下调,P62的表达明显上升(P<0.01或P<0.05);芳香新塔花总黄酮中、高剂量组均显著降低AS模型小鼠血清中TC、TG、LDL-C、VCAM-1、ICAM-1、MMP-2、MMP-9水平(P<0.01或P<0.05),增加HDL-C含量(P<0.01);中、高剂量总黄酮灌胃后小鼠主动脉斑块面积显著减小(P<0.01)且泡沫细胞的含量、管腔的狭窄程度均减弱,明显增加主动脉中LC3的表达和主动脉裂解液中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR表达量,降低P62表达水平(P<0.01或P<0.05)。结果表明,芳香新塔花总黄酮可改善血脂和炎症因子含量,减少主动脉组织中泡沫细胞和斑块的生成,其机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。
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