【摘 要】
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目的建立含有铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA片段的克隆株.方法根据已报道的序列设计铜绿假单胞菌外毒素A基因的特异引物,用PCR方法从标本扩增出预期大小的DNA片段,并将该片段纯
【机 构】
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中国人民解放军第161医院检验科,湖北迪亚生物工程有限公司
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目的建立含有铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA片段的克隆株.方法根据已报道的序列设计铜绿假单胞菌外毒素A基因的特异引物,用PCR方法从标本扩增出预期大小的DNA片段,并将该片段纯化后与T载体连接,转化到大肠埃希菌,筛选出含有插入片段的克隆.结果阳性克隆株经DNA序列测定,证实与已报道的铜绿假单胞菌外毒素A基因DNA序列,在399个碱基中仅有3个碱基不同,但编码的氨基酸完全一致.结论成功构建含有铜绿假单胞菌外毒素A基因的克隆,为大量制备探针和用PCR方法检测铜绿假单胞菌提供了基础.
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