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目的
观察ZBP-89对八聚体结合转录因子4(Oct4)信号通路和肝癌细胞干性的影响。
方法采用免疫组织化学染色法检测120例肝癌组织中ZBP-89、CD133和上皮细胞黏附因子(EpCAM)的表达,分析ZBP-89的表达水平与CD133、EpCAM的相关性。通过ZBP-89过表达的慢病毒载体和小干扰RNA(siRNA)调节Hep3B细胞中ZBP-89的表达,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Oct4、CD133和EpCAM的表达。
结果在肝癌组织中ZBP-89的表达水平和CD133、EpCAM的表达呈负相关(χ2=45.000,P<0.05;χ2=26.020,P<0.05)。当Hep3B细胞中的ZBP-89表达升高时,Oct4、CD133和EpCAM的表达下降,其中mRNA水平分别为对照组的(0.47±0.03)、(0.63±0.01)、(0.53±0.02)倍(P均<0.05),当ZBP-89的表达下降时Oct4、CD133和EpCAM的表达升高,其中mRNA水平分别为对照组的(2.04±0.03)、(1.62±0.03)、(1.79±0.05)倍(P均<0.05)。Western blot与Real-time PCR结果相一致。
结论ZBP-89可通过抑制Oct4信号通路抑制肝癌细胞的干性。