【摘 要】
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目的 用振荡法制备脊髓脱细胞支架修复同种异体大鼠脊髓缺损,观察术后大鼠行为学及组织再生情况.为脊髓缺损后修复提供新的研究思路.方法 将30只SD大鼠脊髓分别用50 ml 3％聚乙
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院手外科及周围神经外科,浙江温州325035;温州医科大学附属第一医院生殖医学中心,浙江温州325035;温州医科大学解剖学教研室,浙江温州325035
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目的 用振荡法制备脊髓脱细胞支架修复同种异体大鼠脊髓缺损,观察术后大鼠行为学及组织再生情况.为脊髓缺损后修复提供新的研究思路.方法 将30只SD大鼠脊髓分别用50 ml 3％聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和2％脱氧胆酸钠溶液在摇床上做振荡处理,对比处理前后细胞残留情况及组织的空间结构,了解支架本身的组织构成.将90只SD大鼠随机分成空白对照组、单纯脊髓缺损组和支架移植组.切除单纯脊髓缺损组和支架移植组大鼠腰椎9～10节段,移植脱细胞支架至支架移植组大鼠.术后饲养12周,期间进行行为学评分观察,分别在4、8及12周时取大鼠损伤部位的脊髓进行HE染色及神经再生相关蛋白免疫荧光检测.结果 通过HE、Masson、甲苯胺蓝染色显示,脱细胞处理后的脊髓脱细胞支架上神经细胞及轴突彻底清除,保留了脊髓细胞外基质.扫描电子显微镜观察发现,支架保留一定多孔网状支架结构.脱细胞支架在体实验中,Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分显示,移植有脱细胞支架的大鼠后肢运动功能恢复优于单纯损伤组大鼠.组织学HE染色显示,脱细胞支架能够填补缺损的脊髓节段,加快损伤脊髓的修复过程.免疫荧光显示,支架移植组大鼠的损伤部位有一定轴突再生.结论 脊髓脱细胞支架保留了细胞外基质并具有一定空间结构,能够一定程度加快脊髓缺损修复,对神经再生具有一定的促进作用.
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