【摘 要】
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目的 探讨沉默肝脏X受体β(LXRβ)对BV2小胶质细胞M1/M2表型变化和炎症因子释放的影响.方法 通过RNA干扰技术沉默小鼠小胶质细胞株(BV2)中LXRβ的表达.实验分为siRNA-NC组(siRNA无关序列对照组)、siRNA-LXRβ组(转染siRNA-LXRβ质粒).转染siRNA-LXRβ后,免疫荧光方法检测LXRβ和Iba1的表达水平;实时荧光定量PCR技术检测LXRβ、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)、小胶质细胞M1型标记物(COX-2、iNOS、CD68)和M2型标记物(A
【机 构】
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400715重庆,西南大学心理学部认知与人格教育部重点实验室;400038重庆,陆军军医大学医学心理系军事认知心理学教研室
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目的 探讨沉默肝脏X受体β(LXRβ)对BV2小胶质细胞M1/M2表型变化和炎症因子释放的影响.方法 通过RNA干扰技术沉默小鼠小胶质细胞株(BV2)中LXRβ的表达.实验分为siRNA-NC组(siRNA无关序列对照组)、siRNA-LXRβ组(转染siRNA-LXRβ质粒).转染siRNA-LXRβ后,免疫荧光方法检测LXRβ和Iba1的表达水平;实时荧光定量PCR技术检测LXRβ、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)、小胶质细胞M1型标记物(COX-2、iNOS、CD68)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的mRNA水平表达.流式细胞术(flow cytometry)检测小胶质细胞M1型标记物(MHCⅡ、CD36)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的表达水平.结果 对BV2细胞分别转染24h、48 h后发现,48 h的siRNA-LXRβ组的LXRβ蛋白及mRNA水平均显著低于NC组(P＜0.001).沉默LXRβ的表达后BV2细胞表现为胞体变圆变大,呈阿米巴样活化状态,炎症因子相关基因TNF-α、IL-6的mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),同时小胶质细胞M1型标记物(COX-2、CD68)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的mRNA表达水平也显著升高(P＜0.05);此外,流式细胞术结果显示沉默LXRβ的表达后小胶质细胞M1型标记物MHCⅡ、M2型标记物(Arg-1、CD206)在BV2小胶质细胞的比例中显著升高(P＜0.01),同时M1/M2比率也明显增多(P＜0.01).结论 沉默LXRβ表达后引起BV2小胶质细胞激活及炎症因子释放增多,促进BV2小胶质细胞向M1型、M2型转化,同时显著升高BV2小胶质细胞中M1/M2的比率.
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