树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对人大肠癌SW620细胞增殖和端粒酶活性的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cowboy94
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目的 探讨细胞因子从大肠癌癌患者外周血贴壁单个核细胞(PBMCs)诱导的树突状细胞(DC)与杀伤细胞(CIK)对人大肠癌SW620细胞增殖的作用及分子机制.方法 用大肠癌患者大肠癌组织裂解物(肿瘤抗原)致敏经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-4等诱导PBMC产生的DC.用干扰素(IFN)-γ、IL-2和人CD3单克隆抗体(hCD3mAb)等诱导该PBMC的悬浮细胞产生CIK细胞.用6孔板将DC-CIK细胞与SW620细胞在同一培养体系内经分别培养24、48、72 h.以噻唑蓝(MTT)法检测癌细胞增殖;以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)-酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测癌细胞端粒酶活性;采用Western blot法检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白.结果 大肠癌细胞经DC-CIK处理72 h后,空白对照组和DC-CIK-a 、DC-CIK-b组相对增殖率分别为(95.6±2.2)%、(73.5±1.8)%、(51.8±1.6)%;端粒酶活性检测发现,空白对照组24、48、72 h端粒酶活性分别为1.568±0.078、1.535±0.056和1.527±0.039;DC-CIK-a组24、48、72 h端粒酶活性分别为1.356±0.056、1.108±0.039和0.578±0.028;DC-CIK-b组24、48、72 h端粒酶活性分别为1.181 ±0.075、0.718±0.039、0.386±0.036.Westernblot检测发现,与空白对照组比较,DC-CIK-a组和DC-CIK-b组hTERT蛋白水平明显下调.结论 DC-CIK细胞可明显抑制大肠癌细胞增殖;抑制端粒酶活性是其重要机制之一。

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