【摘 要】
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目的：探讨内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞损伤时血红素加氧酶1（HO-1）对高尔基体应激的影响。方法：体外培养大鼠肺泡巨噬细胞，采用脂多糖（LPS）诱导大鼠肺泡巨噬细胞建立细胞损伤模型。使用CCK-8法检测细胞活力；使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧簇（ROS）的生成；使用生物化学方法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平；使用TUNEL染色和凋亡相关蛋白caspase-3/7活性检
【机 构】
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天津医科大学南开临床学院天津市中西医结合医院.南开医院麻醉与重症医学科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81772106）；
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目的：探讨内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞损伤时血红素加氧酶1（HO-1）对高尔基体应激的影响。方法：体外培养大鼠肺泡巨噬细胞，采用脂多糖（LPS）诱导大鼠肺泡巨噬细胞建立细胞损伤模型。使用CCK-8法检测细胞活力；使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧簇（ROS）的生成；使用生物化学方法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平；使用TUNEL染色和凋亡相关蛋白caspase-3/7活性检测试剂盒检测细胞凋亡；使用RT-qPCR和Western blot法检测HO-1和高尔基体磷蛋白3（GOLPH3）的表达；使用Western blot法检测高尔基体结构相关蛋白GM130、golgin-97和mannosidase II的表达。使用小干扰RNA（siRNA）沉默HO-1后，重复以上检测。结果：LPS刺激肺泡巨噬细胞下调细胞活力、SOD活性及GM130、golgin-97和mannosidase II表达水平，上调ROS和MDA含量及HO-1和GOLPH3表达水平，并导致TUNEL标记阳性细胞数增多，caspase-3/7活性增强（P<0.05）;HO-1基因沉默后，细胞活力、SOD活性及GM130、golgin-97和mannosidase II表达显著下降，ROS和MDA含量及GOLPH3表达显著上升，TUNEL标记阳性细胞数增多，caspase-3/-7活性显著增强（P<0.05）。结论：内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞损伤时，HO-1可减轻氧化应激和高尔基体应激反应，减少细胞凋亡。
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