弓形虫P24基因细胞内定位载体重组质粒的构建

来源 :中国寄生虫病防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jklbnm123jkl

【摘要】

：

目的构建编码弓形虫RH株P24基因的细胞内定位载体并进行其序列测定.方法弓形虫RH株腹腔接种小鼠,收集腹水,Trizol试剂盒抽提基因组RNA;根据基因库P24基因序列设计合成引物,采

【作者】

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彭碧文郑大利黄清玲陈慧菁林建银蒋明森

【机构】

：

福建医科大学分子医学研究中心,福建医科大学分子医学研究中心,武汉大学医学院寄生虫学教研室

【出处】

：

中国寄生虫病防治杂志

【发表日期】

：

2003年3期

【关键词】

：

弓形虫重组质粒序列测定致密颗粒蛋白P24 基因克隆细胞内定位载体 Toxoplasma gondii P24 clone intracellul

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目的构建编码弓形虫RH株P24基因的细胞内定位载体并进行其序列测定.方法弓形虫RH株腹腔接种小鼠,收集腹水,Trizol试剂盒抽提基因组RNA;根据基因库P24基因序列设计合成引物,采用RT-PCR法扩增编码P24的基因片段,经低熔点琼脂糖法回收并纯化;将P24基因定向克隆到细胞内定位载体pCMV/myc系列:pCMV/myc/cyto(胞质定位)、pCMV/myc/nuc(核定位)、 pCMV/myc/mito(线粒体定位)及pCMV/myc/ER(内质网定位).转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,在氨苄

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