目的:利用荧光差异凝胶电泳技术(2D DIGE)研究大黄虫超微粉剂对大鼠肝纤维化组织蛋白表达的影响。方法:采用超微粉碎技术对大黄虫丸原药材进行剂型改进,用猪血清复制大鼠免疫性肝纤维化模型。实验动物分为正常组、模型组、给药组。正常组ip等渗生理盐水0.5 mL,其余组ip猪血清0.5 mL,每周2次,连续12周。药物组于造模之日起ig给予大黄庶虫虫超微粉水溶液(剂量0.27 g.kg-1),正常组与模型组ig等容积生理盐水,每天1次,连续12周。第12周末处死大鼠,取血与肝组织。检测指标包括肝组织病理学变化:HE染色与Masson染色观察肝纤维化程度;血清纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCIII)、Ⅳ型胶原(IV-C);血清肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)。同时利用2D DIGE和质谱分析技术比较模型组与给药组大鼠肝组织蛋白表达量的差异,用免疫印迹法及免疫组化法对差异蛋白进行验证。结果:模型组肝组织假小叶形成,肝组织胶原纤维含量与血清ALT,AST及HA,LN,PCⅢ,IV-C指标显著高于正常组(P<0.01)。给药组肝脏无假小叶形成,肝组织胶原纤维含量与血清ALT,AST及HA,LN,PCⅢ,IV-C指标显著低于模型组(P<0.01)。2D DIGE结果显示有58个表达量差异大于2倍的蛋白质点,初步鉴定了12个,并验证了Regucalcin,ERp57,CAⅢ蛋白在各组大鼠肝组织的表达,与2D DIGE结果一致。结论:大黄虫超微粉剂能显著降低大鼠肝组织纤维化程度、降低血清纤维化及肝功能指标,提示其对实验性免疫性肝纤维化有较好防治作用;它能调节大鼠肝纤维化组织Regucalcin,ERp57,CAⅢ蛋白表达量,这些蛋白可能通过细胞钙稳态失调、过氧化应激、炎症反应、免疫反应、纤维组织癌变等机制参与肝纤维化的病理过程。