黑色素瘤细胞外泌体对成纤维细胞侵袭和MMP2、MMP9表达的影响

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目的探究黑色素瘤外泌体对成纤维细胞侵袭和MMP2、MMP9表达的影响。方法采用超速离心法提取黑色素瘤细胞外泌体,采用Western blot、透射电镜及粒度检测鉴定外泌体表面标志物及形态大小,采用流式检测及激光共聚焦显微镜观察外泌体被成纤维细胞摄取的过程,Transwell实验检测黑色素瘤外泌体对成纤维细胞侵袭能力的影响,Western blot与免疫细胞化学检测外泌体对成纤维细胞MMP2、MMP9蛋白表达水平的影响,qRT-PCR检测对MMP2、MMP9基因水平的影响。结果电镜下可观察到黑色素瘤外泌体形态呈双层膜,中空,圆形或椭圆形,并且阳性表达外泌体标志物TSG101和黑色素瘤标志蛋白TYRP2。与正常成纤维细胞相比,黑色素瘤外泌体处理的成纤维细胞侵袭能力显著增加(P<0.01),MMP2、MMP9表达显著上调(P<0.05)。结论黑色素瘤外泌体可能通过诱导成纤维细胞MMP2、MMP9的表达,促进成纤维细胞侵袭。
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