用微载体培养家蚕BmN细胞高效表达人α-干扰素基因的实验研究

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在1000ml滚瓶中,用微载体Cytodex3培养家蚕细胞,在合适的培养条件下(细胞接种浓度3.6×105细胞/ml、微载体浓度5g/L),5天后,细胞的终密度达2.8×106细胞/ml,细胞增长指数为7.9。在细胞指数生长期(48~60小时)用载有人α-干扰素(IFN-α)基因的重组病毒接种(感染复数为0.4PFU/细胞),5天后,培养上清中IFN-α效价为6.4×106IU/ml,是用方瓶培养的家蚕BmN细胞IFN-α的表达量的4倍。 The silkworm cells were cultured with microcarrier Cytodex3 in a 1000 ml roller bottle. Under suitable culture conditions (cell inoculum concentration 3.6 × 10 5 cells / ml and microcarrier concentration 5 g / L), the final density of cells reached 2 .8 × 10 6 cells / ml, cell growth index of 7.9. The recombinant virus containing the human interferon-alpha (IFN-a) gene was inoculated at a multiplicity of infection of 0.4 PFU / cell in a cell exponential growth phase (48 to 60 hours) and after 5 days the IFN- The price was 6.4 × 10 6 IU / ml, which was 4 times of the expression level of IFN-α in silkworm BmN cells cultured in a square bottle.
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