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摘要： 本文作者以高效液相色谱法测定甘露醇注射液药液残留，此法简便灵敏，结果准确可靠，适用于甘露醇注射液药液残留的检测。
关键词： 高效液相色谱法 甘露醇注射液 药液残留
高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱；又因分析速度快而被称为高速液相色谱。高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法，与经典液相色谱相比，具有速度快、分辨率高、灵敏度高、样品量少、容易回收和色谱柱可反复使用等优点［１］。它由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。如HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压，高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱［２］。
甘露醇为脱水药，主要用20％的高渗溶液静脉注射或静脉点滴。静脉注射后其脱水作用可迅速降低颅内压和眼内压，是治疗脑水肿、降低颅内压安全而有效的首选药物；也可用于急性肾衰早期，其可增加肾血流量，提高肾小球滤过率，增加尿量，从而防止肾小管萎缩、坏死，改善肾缺血［３］。甘露醇注射液为超饱和溶液，主药成分为甘露醇。因其浓度高，为防止对其他药品的生产造成影响［４］，所以必须对其进行药液残留检测。根据相关技术指导原则［５］，生产用配液罐、管道等部位清洗液的药液残留限度为1.0mg·mL-1。在药液残留检测的研究过程中，本试验采用高效液相色谱法，以磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂（8μm，300mm×7.80mm），0.04mol/L磷酸溶液为流动相，以紫外检测仪为检测器，建立其检测方法［６］，［７］。经药品质量标准分析方法验证，本方法简便灵敏，结果准确可靠，适用于甘露醇注射液药液残留的检测。
1.仪器与试药
1.1仪器
梅特勒AE－240电子天平（上海）；岛津高效液相色谱仪：LC-10ATvp型液相泵，SPD-10Avp型紫外检测器。
1.2试药
甘露醇对照品（由中国药品生物制品检定所提供）；磷酸为色谱纯；水为二次蒸馏去离子水；甘露醇注射液250ml；甘露醇50g。
2.色谱条件与色谱图
2.1色谱条件
色谱柱：以磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂（8μm，300mm×7.80mm）；
流动相：0.04mol/L磷酸溶液为流动相；
检测波长：200nm；
流速：1.0ml·min-1；
柱温：50℃；
进样量：20μL。
2.2对照品溶液制备
精密称取甘露醇对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含甘露醇 1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.3供试品溶液制备
取生产用配液罐、管道等部位清洗液。
在上述条件下，分别取对照品溶液与供试品溶液各20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，甘露醇出峰时间为6.80min，理论板数按甘露醇峰计算应不得低于2000，对照品色谱图见下图。
3.5样品测定
取配液罐、管道等部位清洗液，按上述色谱条件分别取对供试品溶液20μl注入液相色谱仪，以外标法计算，结果各取样点药液残留未检出，由此证明配液罐、管道清洗符合规定。
4.讨论
从谱图和实验数据可以看出，本文提出的测定方法得到了很好的结果。目前，应用HPLC测定糖的文献报道中，大部分使用氨基键合柱、氨基-氨基键合柱等，流动相通常是不同比例的乙腈-水体系，检测器为示差检测器。本法提出使用以磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂（8μm，300mm×7.80mm），0.04mol/L磷酸溶液为流动相，用紫外检测器代替了示差检测器，这样一方面降低了分析费用，提高了工作效率，另一方面提高了实验的安全性。试验证明该法测定甘露醇注射液药液残留，方法简单易行，简便灵敏，色谱条件容易掌握，测试数据重复性好，结果准确可靠，精密度和准确度都能满足分析要求，适用于甘露醇注射液药液残留的检测。
参考文献：
［1］李明远.高效液相色谱及其在药品分析中的应用［M］.北京：北京大学出版社，1988：133-141.
［2］张春霖.高效液相色谱与气相色谱的比较［J］.齐鲁药事，2005，（06）：12-14.
［3］章传真.甘露醇的临床应用［J］.海峡药学，2004，（05）：118-121.
［4］康建功，曾杰，甘为，王新菊.警惕甘露醇所致不良反应［J］.医药导报，2000，（03）：91.
［5］山东省药学会.药品注册指南［M］.济南：山东科学技术出版社，2008：77-79.
［6］王梅，张莘明.我国环境中有机物分析方法及痕量富集技术的进展［J］.环境监测管理与技术，2004.16，(1)：13-16.
［7］阎勇，芦桂华，张华.卫生理化检验文集［M］.北京：北京大学出版社，1999：9-11.
［8］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［S］.北京：化学工业出版社，2005.
关键词： 高效液相色谱法 甘露醇注射液 药液残留
高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于20世纪60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱；又因分析速度快而被称为高速液相色谱。高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法，与经典液相色谱相比，具有速度快、分辨率高、灵敏度高、样品量少、容易回收和色谱柱可反复使用等优点［１］。它由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。如HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压，高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱［２］。
甘露醇为脱水药，主要用20％的高渗溶液静脉注射或静脉点滴。静脉注射后其脱水作用可迅速降低颅内压和眼内压，是治疗脑水肿、降低颅内压安全而有效的首选药物；也可用于急性肾衰早期，其可增加肾血流量，提高肾小球滤过率，增加尿量，从而防止肾小管萎缩、坏死，改善肾缺血［３］。甘露醇注射液为超饱和溶液，主药成分为甘露醇。因其浓度高，为防止对其他药品的生产造成影响［４］，所以必须对其进行药液残留检测。根据相关技术指导原则［５］，生产用配液罐、管道等部位清洗液的药液残留限度为1.0mg·mL-1。在药液残留检测的研究过程中，本试验采用高效液相色谱法，以磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂（8μm，300mm×7.80mm），0.04mol/L磷酸溶液为流动相，以紫外检测仪为检测器，建立其检测方法［６］，［７］。经药品质量标准分析方法验证，本方法简便灵敏，结果准确可靠，适用于甘露醇注射液药液残留的检测。
1.仪器与试药
1.1仪器
梅特勒AE－240电子天平（上海）；岛津高效液相色谱仪：LC-10ATvp型液相泵，SPD-10Avp型紫外检测器。
1.2试药
甘露醇对照品（由中国药品生物制品检定所提供）；磷酸为色谱纯；水为二次蒸馏去离子水；甘露醇注射液250ml；甘露醇50g。
2.色谱条件与色谱图
2.1色谱条件
色谱柱：以磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂（8μm，300mm×7.80mm）；
流动相：0.04mol/L磷酸溶液为流动相；
检测波长：200nm；
流速：1.0ml·min-1；
柱温：50℃；
进样量：20μL。
2.2对照品溶液制备
精密称取甘露醇对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含甘露醇 1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.3供试品溶液制备
取生产用配液罐、管道等部位清洗液。
在上述条件下，分别取对照品溶液与供试品溶液各20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，甘露醇出峰时间为6.80min，理论板数按甘露醇峰计算应不得低于2000，对照品色谱图见下图。
3.5样品测定
取配液罐、管道等部位清洗液，按上述色谱条件分别取对供试品溶液20μl注入液相色谱仪，以外标法计算，结果各取样点药液残留未检出，由此证明配液罐、管道清洗符合规定。
4.讨论
从谱图和实验数据可以看出，本文提出的测定方法得到了很好的结果。目前，应用HPLC测定糖的文献报道中，大部分使用氨基键合柱、氨基-氨基键合柱等，流动相通常是不同比例的乙腈-水体系，检测器为示差检测器。本法提出使用以磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂（8μm，300mm×7.80mm），0.04mol/L磷酸溶液为流动相，用紫外检测器代替了示差检测器，这样一方面降低了分析费用，提高了工作效率，另一方面提高了实验的安全性。试验证明该法测定甘露醇注射液药液残留，方法简单易行，简便灵敏，色谱条件容易掌握，测试数据重复性好，结果准确可靠，精密度和准确度都能满足分析要求，适用于甘露醇注射液药液残留的检测。
参考文献：
［1］李明远.高效液相色谱及其在药品分析中的应用［M］.北京：北京大学出版社，1988：133-141.
［2］张春霖.高效液相色谱与气相色谱的比较［J］.齐鲁药事，2005，（06）：12-14.
［3］章传真.甘露醇的临床应用［J］.海峡药学，2004，（05）：118-121.
［4］康建功，曾杰，甘为，王新菊.警惕甘露醇所致不良反应［J］.医药导报，2000，（03）：91.
［5］山东省药学会.药品注册指南［M］.济南：山东科学技术出版社，2008：77-79.
［6］王梅，张莘明.我国环境中有机物分析方法及痕量富集技术的进展［J］.环境监测管理与技术，2004.16，(1)：13-16.
［7］阎勇，芦桂华，张华.卫生理化检验文集［M］.北京：北京大学出版社，1999：9-11.
［8］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［S］.北京：化学工业出版社，2005.