【摘 要】
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目的探讨蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)的激活剂及抑制剂对胃癌耐药细胞系P-糖蛋白(P-glycoprotein, Pgp)功能及表达的影响.方法用免疫细胞化学及流式细胞仪方法检测PgP
【机 构】
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第四军医大学西京医院消化科,第四军医大学中心实验室;
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目的探讨蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)的激活剂及抑制剂对胃癌耐药细胞系P-糖蛋白(P-glycoprotein, Pgp)功能及表达的影响.方法用免疫细胞化学及流式细胞仪方法检测PgP在胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR及其药敏细胞系SGC7901的表达,并观察了PKC的激活剂佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acctate,PMA)和抑制剂H-7作用不同时间Pgp表达的变化.用免疫荧光双标记及共聚焦显微镜技术观察PKC-α及Pgp在胃癌耐药细胞系及其药敏细胞系的共同表达.用罗丹明123(Rohdamin 123,R123)作为荧光探针检测PMA及H-7对细胞内药物浓度的影响.结果 Pgp在耐药细胞系SGC7901/VCR表达呈阳性,在药敏细胞系SGC7901表达呈弱阳性.PKC-α与Pgp在SGC7901/VCR及SGC7901细胞系细胞膜均有共同表达,以SGC7901/VCR细胞系共同表达明显.PMA处理细胞,细胞内R123的平均荧光强度明显减低,Pgp的功能增强而表达减少,且有时间依赖性;H-7处理细胞,细胞内R123的平均荧光强度明显增加,Pgp的功能减弱而表达增加,也有时间依赖性.结论 PKC可能通过调节Pgp的功能与表达而参与胃癌细胞多药耐药的形成.
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