【摘 要】
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从GeneBank的 1段含六邻体蛋白基因、蛋白酶基因、DNA结合蛋白基因的序列中 ,应用Primer软件设计了 2对引物。用这 2对引物在分别对反应体系成分和聚合酶链反应 (PCR)试验条
【机 构】
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云南农业大学动物科学技术学院!云南昆明650201; 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室!云南昆明650224;
【基金项目】
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云南省应用基础研究基金资助项目!(96C0 53M)
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从GeneBank的 1段含六邻体蛋白基因、蛋白酶基因、DNA结合蛋白基因的序列中 ,应用Primer软件设计了 2对引物。用这 2对引物在分别对反应体系成分和聚合酶链反应 (PCR)试验条件进行优化后 ,成功地建立了减蛋综合征病毒(EDSV)套式PCR检测技术。对鹌鹑源EDSVQAVC 94株、AV xb西北分离株、AV 1 2 7国际标准株扩增结果 ,第一轮PCR得到约2 90bp的特异性片段 ,第二轮PCR得到约 90bp的片段 ,与预期的 2 89bp、89bp的设计相符合。而传染性腔上囊病病毒(IBDV)疫苗株B87、鸡新城疫病毒 (NDV)Ⅳ系疫苗株 (LaSota)和正常尿囊液等对照的扩增结果均未显示任何扩增条带 ,有很好的特异性。所建立的套式PCR检测方法具有特异、灵敏、快速的优点 ,其灵敏度比常规PCR灵敏 10 0倍 ,可检测出 0 .0 1fg的DNA模板。
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