【摘 要】
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提取小反刍兽疫病毒（PPRV）疫苗株Nigeria75／1的总RNA，用RT—PCR方法扩增F基因并克隆到pMD18-T载体中，以鉴定正确的质粒为模板克隆去掉N端信号肽和跨膜区的F基因（F-1）并亚克隆于原核
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,新疆农业大学动物医学学院
【基金项目】
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国家农业公益性行业科研专项（200803018）,甘肃省国际合作项目（0804WCGA133）
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提取小反刍兽疫病毒（PPRV）疫苗株Nigeria75／1的总RNA，用RT—PCR方法扩增F基因并克隆到pMD18-T载体中，以鉴定正确的质粒为模板克隆去掉N端信号肽和跨膜区的F基因（F-1）并亚克隆于原核表达载体pET-30a（＋），得到重组质粒pET30-F-1，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，表达产物进行SDS—PAGE、Western—blot分析，同时将重组蛋白免疫SPF家兔制备抗体，进行间接免疫荧光检测并用ELISA测定抗体效价。结果显示，目的基因正确插入了表达载体，在大肠杆菌中
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