【摘 要】
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从小牛皱胃中提取凝乳酶（Chymosin）总RNA,经过RT-PCR获得凝乳酶cDNA,纯化后与pMD-18T载体连接,转化大肠杆菌JM109,通过双酶切和序列测定,获得了凝乳酶全长基因序列。序列测定表
【机 构】
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吉林省农业科学院农产品加工研究中心
【基金项目】
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国家863计划项目（2006AA10Z306）, 吉林省科技厅重点项目（20060219、20080228）, 现代农业产业体系专项资金项目
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从小牛皱胃中提取凝乳酶（Chymosin）总RNA,经过RT-PCR获得凝乳酶cDNA,纯化后与pMD-18T载体连接,转化大肠杆菌JM109,通过双酶切和序列测定,获得了凝乳酶全长基因序列。序列测定表明,凝乳酶全长核苷酸长度为1 143 bp,编码381个氨基酸。与GenBank上已发表序列NM_180994进行比较,核苷酸同源性为99.56%。将该基因片段克隆到原核表达载体pET-22b中,构建重组质粒pET-22b/Chymosin,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确
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