【摘 要】
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本研究根据已发表的小核糖核酸病毒（picornavirus）核苷酸序列设计4对引物。以RNAiso Reagent试剂抽提含DHV A66鸡胚尿囊液总RNA，用TakaRa RNA PCR Kit（AMV）Vet3．0试剂盒进行RT—PCR
【机 构】
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安徽省农科院畜牧兽医研究所,江苏省农科院兽医研究所,南京天邦生物科技有限公司
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本研究根据已发表的小核糖核酸病毒（picornavirus）核苷酸序列设计4对引物。以RNAiso Reagent试剂抽提含DHV A66鸡胚尿囊液总RNA，用TakaRa RNA PCR Kit（AMV）Vet3．0试剂盒进行RT—PCR扩增，将所得PCR产物回收并克隆于pMD18-T载体、转化感受态细菌DH5a，利用氨苄青霉素筛选阳性克隆子，经EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切鉴定重组质粒。取重组阳性质粒进行测序，测序结果与近期GenBank登录的3株Ⅰ型DHV核苷酸序列比对，结果显示与03D株、H株、5
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