【摘 要】
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目的探讨穿透肽介导的铜-锌超氧化物歧化酶1融合蛋白(PEP-1-SOD1)在脊髓损伤早期的抗氧化作用及对脂肪干细胞(ADSCs)移植修复脊髓损伤的促进作用。方法体外分离培养SD大鼠ADSCs,并以携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒感染ADSCs。取成年SD大鼠96只,以改良Allen法制作脊髓损伤模型,随机分为3组:盐水治疗组、ADSCs治疗组、PEP-1-SOD1联合ADSCs治疗组(联合治
【机 构】
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430060 武汉大学人民医院骨科;442000 十堰,湖北医药学院附属人民医院,430060 武汉大学人民医院骨科
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目的探讨穿透肽介导的铜-锌超氧化物歧化酶1融合蛋白(PEP-1-SOD1)在脊髓损伤早期的抗氧化作用及对脂肪干细胞(ADSCs)移植修复脊髓损伤的促进作用。
方法体外分离培养SD大鼠ADSCs,并以携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒感染ADSCs。取成年SD大鼠96只,以改良Allen法制作脊髓损伤模型,随机分为3组:盐水治疗组、ADSCs治疗组、PEP-1-SOD1联合ADSCs治疗组(联合治疗组),术后1、3、7 d各取8只大鼠分别行超氧化物歧化酶(SOD)活性检测及丙二醛(MDA)含量检测,术后7 d各取4只大鼠行细胞凋亡检测;术后1、2、3、4周行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分,术后4周BBB评分后处死大鼠行神经元特异性核蛋白(NeuN)表达阳性细胞检测,对ADSCs治疗组及联合治疗组行脊髓损伤区域绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞检测。
结果术后7 d ADSCs治疗组SOD活性大于盐水治疗组(t=3.882,P=0.030),MDA含量小于盐水治疗组(t=10.392 ,P=0.002),联合治疗组SOD活性大于ADSCs治疗组(t=4.690,P=0.018),MDA含量小于ADSCs治疗组(t=3.464,P=0.031)。术后7 d联合治疗组细胞凋亡少于ADSCs治疗组(t=13.416,P=0.000),ADSCs治疗组细胞凋亡多于盐水治疗组(t=12.000,P=0.000)。术后4周,联合治疗组BBB评分为(18.59±1.54)分大于ADSCs治疗组[(11.90±1.72)分,t=8.430,P=0.000];联合治疗组NeuN阳性细胞百分比为(61.65±12.65)%大于ADSCs治疗组的(31.45±5.76)%(t=154.214,P=0.000);联合治疗组GFP阳性细胞数大于ADSCs治疗组(t=64.325,P=0.000)。
结论与单纯ADSCs移植比较,联合应用PEP-1-SOD1进一步增加损伤局部SOD活性,降低MDA含量,改善运动功能,PEP-1-SOD1发挥了协同效果,这可能与减少移植细胞凋亡有关。
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