在石蜡切片中进行微切割-PCR-银染的方法

来源 :中华医学遗传学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HUANGKAO2
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目的 探索在石蜡切片中应用微切割-PCR-银染技术,检测大肠癌的微卫星不稳定性和杂合性缺失.方法 用微切割技术在28例石蜡切片中提取淋巴细胞和间质细胞、癌旁粘膜腺管、不典型增生腺管、腺瘤腺管和腺癌细胞,每例至少包含3种类型细胞,经蛋白酶K消化后,直接用于PCR扩增,产物进行8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染.共进行了TGF-βRⅡ(A)10、hMSH2(A)26-Bat26,hMSH3(A)8,hMSH6(C)8 4个微卫星位点的检测.结果 hMSH3(A)8和hMSH6(C)8位点在28例标本全部扩增出目的片段,而TGF-βRⅡ(A)10和hMSH2(A)26位点则分别有23例、22例扩增出目的片段,且hMSH2(A)26位点有5例癌细胞呈阳性,其中1例同时有腺瘤细胞阳性.结论 微切割-PCR-银染技术应用于石蜡切片,可获得较满意的结果,可用于检测微卫星不稳定性等研究.

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